IL-35在重症肌无力发病机制中作用的研究

Interleukin (IL)-35, a newly identified member of the IL-12 family, is mainly produced by regulatory T cells. IL-35 suppresses the differentiation of helper T cells and their function of secreting inflammatory cytokines. In addition, IL-35 stimulates regulatory T cells and B cells to secrete regulatory cytokines, which enhances their regulatory function. However, the role of IL-35 in Myasthenia Gravis (MG) was unknown. Our preliminary data showed that the serum levels of IL-35 were lower in general MG than in ocular MG. IL-35 serum levels were negatively correlated with disease severity in general MG. Thus, we hypothesize that IL-35 may play an important role in downregulating the inflammatory reaction in MG. In our study, we will detect the serum levels of IL-35 and frequency of IL-35-secreting cells in patients with MG, observe the effect of IL-35 deficiency on the morbidity and severity of experimental autoimmune MG (EAMG), and evaluate the therapeutical effect of the recombinant IL-35 and reinfusion of IL-35 stimulated T and B cells in EAMG. This will be achieved through the use of flow cytometry, ELISA, PCR, and other necessary methods. Our work will help to clarify the role of IL-35 in the pathogenesis of MG, reveal whether IL-35 could be a biomarker to evaluate disease severity and response to immunosuppressive therapy, and to reveal whether IL-35 could be a potential target for MG treatment.

白介素(Interleukin, IL) 35是体内IL-12家族新成员，主要由调节性T细胞分泌，抑制辅助性T细胞分化及分泌促炎因子，正反馈刺激调节性T细胞及B细胞分泌调节因子，下调炎症反应。IL-35在重症肌无力(Myasthenia Gravis, MG)中的作用尚无报道。我们前期数据显示全身型MG患者血清IL-35水平显著低于眼肌型，且与疾病严重程度负相关。据此我们提出假设：IL-35可能抑制MG炎症反应。本项目将以MG患者、基因敲除及野生鼠构建的MG模型为研究对象，利用流式细胞术、ELISA、PCR等方法检测MG患者血清IL-35水平、分泌IL-35的细胞频率数量及功能；观察 IL-35缺失对实验性自身免疫性MG鼠的发病及病情影响；评估重组IL-35干预或回输经IL-35刺激的T、B细胞对MG鼠的治疗作用。明确IL-35在MG中的炎症抑制作用及是否可作为MG病情评估指标和治疗靶点。

白介素(Interleukin, IL) 35是IL-12家族新成员，主要由调节性T细胞分泌，抑制辅助性T细胞分化及分泌促炎因子，下调炎症反应。IL-35在重症肌无力(Myasthenia Gravis, MG)中的作用尚无报道。我们初步推测在MG中，IL-35可能起到抑制炎症反应的作用。在本项目研究中，我们通过研究MG患者及EAMG小鼠模型，探索了IL-35在MG中的作用。我们检测了MG患者及健康对照外周血IL-35的水平，应用流式细胞术检测MG患者T、B细胞亚群的变化，我们研究发现MG患者血清IL-35水平降低，MG患者血清IL-35水平与患者临床评分均呈负相关，MG患者外周血IL-35+T细胞B细胞比例低于健康对照组。此外，我们还发现经治疗后的MG患者血清IL-35水平和外周血IL-35+T细胞B细胞比例均显著升高，提示IL-35在MG免疫治疗中具有疗效评价价值。我们同时构建了EAMG模型，以期望在此基础上进一步研究IL-35在EAMG中发挥免疫调节作用的机制。我们进一步采用流式细胞仪分选出CD4+T细胞，发现IL-35能正反馈作用于T细胞进一步分泌IL-35；IL-35干预后IL-17A及RORγt的mRNA表达下降，Th17细胞的比例降低，进而明确了MG患者中IL-35对Th17细胞的影响。我们还探讨了MG患者的认知功能特征，疲劳、自我效能和精神症状对MG患者生活质量的影响，以及IL-27、IL-36γ、irisin在MG中的作用。我们同时探索了其它神经系统免疫病临床特点及免疫炎性指标变化特征，主要包括多发性硬化（MS），视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD），自身免疫性脑炎（AE），格林巴利综合症（GBS）等，为后续研究奠定基础。这些研究将有助于深入理解IL-35在MG 致病机制中的作用，有利于对 MG 疾病严重程度、免疫调节药物疗效和预后进行评估，进而为其它自身免疫性疾病提供更好的临床监测指标和治疗靶点，具有较高的经济效益和广阔的社会价值。