光快门漂白进样-电泳媒介微分析法连用的毛细管电泳在线酶反应研究平台

本项目将建立以光快门漂白进样与电泳媒介微分析法连用的毛细管电泳在线酶反应研究试验平台（OGPB-EMMA），并将用于两种重要酶体系，蛋白酶和谷胱甘肽S-转移酶的酶反应和酶抑制反应动力学研究。与一般EMMA技术相比，本项目结合OGPB进样技术，利用其少量进样的精确和多次进样的重现性等优点，提高酶活性和酶反应动力学测定准确性。OGPB进样还可突破激光诱导荧光检测对反应底物的苛刻要求，使高荧光发射底物的研究应用成为可能，扩展酶底物的研究范围。实验平台将采用连续模式-区带模式EMMA法研究酶抑制反应，无需参照实验，便可从同一个实验中获得酶抑制反应动力学的信息。本项目旨在通过建立一个有效的高通量酶体系的测定平台，快速、准确、高效地获取酶反应和抑制反应的动力学数据，从而帮助我们深入了解酶活性和酶反应动力学机制，以及实现酶抑制剂的高通量筛选，对生物酶学以及抑制剂类药物的研发具有重要的实验意义和应用价值。