髓鞘少突胶质细胞糖蛋白自身抗体在视神经脊髓炎谱系疾病中的作用研究

The role of aquaporin-4 antibody(AQP4-Ab) in neuromyelitis optica spectrum disorder(NMOSD)has been well recognized. However, 20-40% of NMOSD patients are seronegative for AQP4-Ab and the autoantigens of these patients remain unknown. Recently,anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody(MOG-Ab) has been found in NMOSD patients. Our preliminary data showed that 20% of NMOSD patients in our database carried MOG-Ab, and the T cells from these patients were responsive to MOG stimulation. The results suggested that MOG-Ab may be another autoantigen candidate to NMOSD. In this project, we will screen the AQP4-Ab and MOG-Ab in NMOSD patient sera. We will collect and purify the IgG from different seropositive patients. We will determine the complement dependent cytotoxicity(CDC) and the antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity(ADCC) activity of the different antibodies on the cultured primary mixed glia cells and spinal cord slices from wild type or AQP4 knockout mice, and also on the wild type or AQP4 knockout mice which are performed by cerebral ventricular IgG injection. Meanwhile, we will observe whether there are MOG-specific T cells in MOG-Ab positive NMOSD patients. The study will clarify whether MOG is another target of the immune attack in NMOSD patients. The results will promote better understanding functions of MOG-Ab in NMOSD and the pathogenesis of NMOSD as well.

水通道蛋白4抗体（AQP4-Ab）被认为是视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD）的致病因素，而20-40% NMOSD患者AQP4-Ab阴性，其免疫攻击抗原不明。近期发现NMOSD患者血清中存髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体（MOG-Ab），我们初步检测到20% NMOSD患者MOG-Ab阳性，其T细胞对MOG有特异反应，推测MOG-Ab是NMOSD另一致病因素。本研究继续筛查NMOSD患者血清AQP4及MOG抗体，纯化血清抗体IgG,观察不同抗体状态患者IgG单独或结合补体后对体外培养的野生鼠或AQP-4基因敲除鼠的混合胶质细胞、脊髓切片及抗体补体脑室注射动物模型的病理损伤，研究MOG-Ab对抗原表达细胞的杀伤作用，研究MOG-Ab阳性患者T细胞对不同肽段MOG抗原的免疫反应，以明确MOG是否为NMOSD的另一攻击靶标，结果有助于更好地认识NMOSD的免疫病理机制并明确MOG-Ab在疾病中的作用。

背景：水通道蛋白4抗体（AQP4-Ab）被认为是视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD）的致病抗体，而20-40% NMOSD患者AQP4-Ab阴性，其免疫攻击抗原不明。我们初步推测髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体（MOG-Ab）是NMOSD另一致病因素。研究内容：我们建立了基于荧光免疫细胞技术的MOG抗体的检测方法；发现NMOSD患者血清存在MOG-Ab；筛选了NMOSD中AQP4-Ab及MOG-Ab阳性患者以及建立了血清IgG分离纯化的方法；通过纯化MOG-Ab的体外实验，证实了MOG-Ab存在补体激活后引发的炎症损伤，提示MOG-Ab的致病性。在继续积累MOG 抗体阳性NMOSD患者病例及生物标本以进一步研究MOG抗体阳性NMOSD特征同时，我们探索了NMOSD及其他神经系统免疫性疾病中炎症因子的变化；抗体滴度与病情的相关性；发现口服孕酮可能致NMO患者的病情复发，提示雌激素水平的变化可能与疾病复发有关。我们进一步分析了我国NMOSD患者的临床特点，包括不同发病年龄、不同抗体状态的临床特点；研究了NMOSD的非典型症状，如嗅觉障碍；在NMOSD的治疗方面，我们发现抗利妥昔单抗抗体存在于接受利妥昔单抗治疗的NMOSD患者外周血中并影响疗效。重要结果：建立了MOG-Ab检测和血清IgG纯化的方法，证实了MOG-Ab的致病性；IL-27、IL-35和抵抗素的血清浓度变化及与临床严重程度的相关性提示其在致病机制中发挥作用，是NMOSD等免疫性疾病重要炎症生物标志物。口服孕酮可能会引起机体免疫系统的变化进而引起复发，同时NMO患者的复发也可能与体内激素的波动有关。明确了NMOSD中AQP4-Ab及MOG-Ab阳性患者临床、影像存在差异，NMOSD患者急性期血清AQP4-Ab水平与EDSS 评分、脊髓受累节段数、头MRI病灶数均呈正相关。发现了早发和迟发型NMOSD患者的临床特征具有差异。证实了NMOSD及多发性硬化、重症肌无力患者中均存在不同程度的嗅觉功能障碍。发现小剂量利妥昔单抗治疗NMOSD时，部分患者体内存在抗利妥昔单抗抗体并影响药物疗效。科学意义：明确了MOG抗体的致病性，并对NMOSD从发病机制到临床特征及治疗有了较为丰富的探索。