抗MuSK抗体的检测及在重症肌无力发病中的作用研究

肌肉特异性激酶（MuSK）是肌细胞膜上的一种跨膜蛋白质，在乙酰胆碱受体（AChR）聚集在突触后膜上形成神经肌肉接头中起促进作用。大约10% AChR抗体（AChRAb）阴性的重症肌无力（MG）患者存在抗MuSK抗体（MuSKAb），这些抗体能否介导MG的发病还不清楚。本研究以人的MuSK细胞外区与荧光蛋白构建融合蛋白，并作为抗原检测AChRAb阴性的MG患者血清中的MuSKAb。将获得的MuSKAb阳性的MG患者血清（或其IgG抗体）注射各种敏感大鼠以诱导MG，并在培养的细胞中观察其对细胞的影响。将表达的人的MuSK细胞外区免疫敏感小鼠，建立MG动物模型，以评价MuSKAb的致病性；从敏感小鼠制备抗MuSK单克隆抗体，并在大鼠和培养细胞中测定其致病作用。通过对人和动物、体内和体外的系统研究，探讨MuSKAb的致病作用及其机制，这对临床诊断和治疗AChRAb阴性的MG患者具有重要的指导意义。

肌肉特异性激酶（MuSK）是肌细胞膜上的一种跨膜蛋白质，在乙酰胆碱受体（AChR）聚集在突触后膜上形成神经肌肉接头中起促进作用。大约10% AChR抗体（AChRAb）阴性的重症肌无力（MG）患者存在抗MuSK抗体（MuSKAb），这些抗体能否介导MG的发病还不清楚。本研究以人的MuSK细胞外区与荧光蛋白构建融合蛋白，并作为抗原检测AChRAb阴性的MG患者血清中的MuSKAb。共检测了80例MG患者血清，发现7例为MuSKAb阳性。将不同剂量的羊抗人MuSK多克隆抗体腹腔注射、以及将不同剂量的小鼠抗大鼠MuSK单克隆抗体静脉注射雌性8周龄Lewis大鼠，逐日观察动物肌肉收缩强度；处死动物，取肌肉组织，应用免疫荧光实验，以荧光素标记的兔抗羊抗体检查肌细胞表面是否结合MuSKAb，同时做电镜检查神经肌肉接头处突触后膜的超微结构变化。实验结果表明，实验动物的临床表现没有发现肌无力症状及体征，但是肌肉组织中的神经肌肉接头处有抗体结合，并且超微结构出现MG的病理变化。将不同剂量的MuSKAb阳性的MG患者血清注射雌性8周龄Lewis大鼠，实验结果显示，实验动物的临床表现没有发现肌无力症状及体征，肌肉组织中的神经肌肉接头处也没有抗体结合，并且超微结构也未出现MG的病理变化。MuSKAb对MG的致病性还需要进一步的实验证明。