酪氨酸磷酸酶PTPN13在肠癌发生中的功能研究

肠癌是近二、三十年来发病数和死亡数在世界范围内上升最快的肿瘤之一。蛋白酪氨酸磷酸化几乎调控着哺乳动物细胞所有的生命过程。酪氨酸磷酸化调控失调是肿瘤发生的一个重要机制。以往研究发现酪氨酸磷酸酶PTPN13在肠癌中存在突变，而且近一半突变是无义突变或移框突变，推测可能是抑癌基因。因其能与Fas相互作用故又称FAP-1，但PTPN13在Fas介导的细胞凋亡中的功能还不清楚。本研究拟利用AAV介导的体细胞基因敲除技术在肠癌细胞系中获得PTPN13敲除细胞系，一方面通过比较PTPN13野生型和突变体的 表型变化和对Fas介导的细胞凋亡的敏感性，研究PTPN13在Fas信号通路中的功能；另一方面结合蛋白质组学方法筛选PTPN13磷酸酶底物，并进一步验证。通过这一系列的研究，不仅可以阐明PTPN13在肠癌发生中的功能，所参与的信号通路，而且也为肠癌的早期诊断和治疗靶标提供理论基础。

肠癌是近二、三十年来发病数和死亡数在世界范围内上升最快的肿瘤之一。蛋白酪氨酸磷酸化几乎调控着哺乳动物细胞所有的生命过程。酪氨酸磷酸化调控失调是肿瘤发生的一个重要机制。以往研究发现酪氨酸磷酸酶PTPN13在肠癌中存在突变，而且近一半突变是无义突变或移框突变，推测可能是抑癌基因。因其能与Fas相互作用故又称FAP-1，但PTPN13在Fas介导的细胞凋亡中的功能还不清楚。本研究利用AAV介导的体细胞基因敲除技术在肠癌细胞系中获得PTPN13敲除细胞系，比较PTPN13野生型和突变体的表型变化发现，PTPN13对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用，H2O2处理PTPN13野生型和敲除型HCT116肠癌细胞系后通过流式检测其ROS水平的变化，结果显示HCT116 PTPN13-/-细胞株对H2O2诱导的ROS更敏感。此外结合蛋白质组学方法我们还对PTPN13磷酸酶底物进行了筛选，并进一步验证。通过这一系列的研究，为阐明PTPN13在肠癌发生中的功能，所参与的信号通路提供理论基础。在该经费的资助下已发表SCI论文两篇，培养硕士研究生2名，在读博士生4名，硕士生6名。