基于液滴技术的蛋白质组分离分析新方法

蛋白质组体系的高度复杂性迫切需求能够提供更高分辨率的多维分离技术。本研究采用微液滴技术，基于其微体积、低扩散、无返混等优点作为多维分离接口的解决方案，耦合微柱液相色谱与毛细管电泳技术，构建高峰容量的多维微分离平台；并将该平台与质谱检测技术联用，分析复杂的蛋白质和多肽样品。在此基础上，进一步考察该技术平台对于真实蛋白质组体系的分离分析效能，推动多维分离技术的发展。

本项目基于液滴微流控技术建立了新型高效的多维分离接口，用于耦合纳流液相色谱与毛细管电泳等微分离技术以构建高效多维微分离平台，实现了蛋白降解物等复杂体系的高分辨分离分析，并证实了其在蛋白质组学中的应用潜能。经过三年的研究，在以下方面取得显著创新：.1，开发“切割”与“提取”功能芯片构筑液滴微流控接口。通过该接口实现连续流-非连续流-连续流的转化，高效地操控纳流色谱的流出物，实现纳升级样品的分集，储存和再进样。.2，建立高效毛细管柱技术，考察复杂多肽混合物的高效纳流液相色谱和毛细管电色谱分离，进而实现单维分离的峰容量最大化。.3，基于液滴接口和毛细管柱技术构建高效二维/三维微分离平台，实现生物样品的高分辨多维分离分析。.4，探索基于液滴接口的液相分离-质谱检测联用平台，初步证实其可行性及其在蛋白质组学研究中的应用潜能。