miR-21对神经母细胞瘤增殖、分化和转移的调控研究

神经母细胞瘤是小儿最常见的胚胎性恶性肿瘤，进展快，治疗难，预后差。miR是调控肿瘤和胚胎发育的重要内源性分子。前期工作利用了miR芯片和生物信息学技术，预测出miR21为研究神经母细胞瘤的靶miR。拟比较不同生物学特性（1pLOH，N-myc扩增，病理学分型，临床分期和分组）的神经母细胞瘤组织在miR21表达上的差异性；对神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y）转染anti-miR21和使用antagomiR21对裸鼠皮下移植瘤进行干预，观察miR21抑制对神经母细胞瘤生物学特性的影响；对人正常肾上腺髓质细胞转染miR21前体，观察其过表达对正常细胞生物学特性的影响。采用荧光素酶基因报告系统，研究miR21对下游靶基因（PDCD4、TGF-β和TIMP3）的调控作用。探索miR21对神经母细胞瘤增殖、分化和转移的调控作用，寻找其治疗的有效靶点，为胚胎性肿瘤生物学特性和治疗研究提供新的切入点。

本研究发现miR-21在神经母细胞瘤、胚胎肾上腺和正常肾上腺的表达的差异，其中神经母细胞瘤中表达最高，正常肾上腺表达最低，提示miR-21参与了胚胎异常发育所引起的神经母细胞瘤的发生。神经母细胞瘤生物学特性和miR-21表达的相关性分析表明，高分期，高危险度分组，mycn表达阳性和组织预后不良型，均与miR-21高表达呈正相关。通过抑制神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH中miR-21的表达，可以有效抑制肿瘤细胞的增殖，诱导凋亡，减少迁移，并下调mTOR基因、蛋白的表达，同时上调PTEN基因的表达。将受慢病毒转染的miR-21抑制表达的细胞移植到裸鼠皮下，发现瘤体增殖较对照组明显减慢。说明miR-21参与调节了神经母细胞瘤细胞的增殖、凋亡和迁移，并可能和mTOR通路起协同作用。