中药泽兰有效成分齐墩果酸诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的分子调控机制

增生性瘢痕的发生率很高，常常严重影响人体美观和机体功能，成纤维细胞在瘢痕形成过程中起着至关重要的作用，促进其凋亡可显著减轻瘢痕形成。目前对瘢痕成纤维细胞凋亡的分子调控机制并不清楚。本课题拟在前期研究基础上，综合运用分子药理学和细胞分子生物学等学科知识，采用western blot、FQ-PCR、ELISA、TUNEL、特异信号通路阻断、荧光分析、流式分析、免疫组化和激光共聚焦等方法，研究中药泽兰有效成分齐墩果酸对动物瘢痕组织成纤维细胞凋亡相关蛋白基因表达的影响，对人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞信号转导通路、凋亡途径及关键凋亡相关蛋白分子的调控作用，以期较为系统地阐明其诱导瘢痕细胞凋亡的分子机制，为增生性瘢痕的防治提供新思路和新策略。该项目的实施对在分子水平阐明相关中药复方药效物质的配伍作用机制；解释相关中药效应；发现新的药物作用靶点，进而建立特异高通量筛选模型以及中药新药研究等均具有重要意义。

增生性瘢痕的发生率很高，常常严重影响人体美观和机体功能，成纤维细胞在瘢痕形成过程中起着至关重要的作用，促进其凋亡可显著减轻瘢痕形成。目前对瘢痕成纤维细胞凋亡的分子调控机制并不清楚。本课题综合运用分子药理学和细胞分子生物学等学科知识，采用western blot、FQ-PCR、ELISA、TUNEL、特异信号通路阻断、荧光分析、流式分析、免疫组化和激光共聚焦等方法，研究天然化合物齐墩果酸对动物瘢痕组织成纤维细胞凋亡相关蛋白基因表达的影响，对人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞信号转导通路、凋亡途径及关键凋亡相关蛋白分子的调控作用。研究结果表明，齐墩果酸（OA）能显著诱导皮肤增生性瘢痕成纤维细胞凋亡，其分子机制为通过激活p38和JNK信号通路，促进Bax蛋白从细胞质转位到线粒体膜，调节Bax和Bcl-2的表达，破坏线粒体膜电位，增加细胞色素c和凋亡诱导因子从线粒体的释放，激活canspase-3和-9，但并不激活caspase-8，随后诱导增生性瘢痕细胞凋亡。动物皮肤瘢痕试验表明，OA乳膏预防性和治疗性给药均显著抑制家兔皮肤瘢痕增生，其机制与明显降低瘢痕组织胶原I和III、TGF-β1、TIMPs和P311水平，增加caspase-3和-9水平，诱导瘢痕细胞凋亡密切相关。这些结果提示，OA对皮肤增生性瘢痕形成具有明显抑制作用，可进一步开发应用。