NS5ATP9在食管癌中的功能研究及其相关基因的筛选

NS5ATP9蛋白与肿瘤的发生、发展有关，我们发现NS5ATP9蛋白在食管癌中高表达，定位于细胞核，可能是一个转录因子，但是对其在食管癌中功能却知之甚少。本课题通过细胞增殖、软琼脂培养克隆形成和裸鼠成瘤实验观察NS5ATP9对细胞行为的影响；通过激光共聚焦显微镜观察GFP-NS5ATP9融合蛋白的亚细胞定位，并应用Western Blot进行验证；通过免疫组织化学、实时定量PCR和Western Blot实验观察NS5ATP9在食管癌中的表达，并结合临床资料，分析NS5ATP9与食管癌临床病理、早期复发和预后的关系；应用微阵列-比较基因组杂交（aCGH芯片）技术，对NS5ATP9在食管癌中的相关调控基因进行筛选。通过以上研究，试图揭示NS5ATP9作为食管癌肿瘤标志物可能性，并且通过构建NS5ATP9交互网络图，对阐明其在食管癌中的作用机制提供有益的线索，为肿瘤基因治疗提供新的靶点。

NS5ATP9与肿瘤的发生、发展有关，我们发现NS5ATP9在食管癌中高表达，定位于细胞核，可能是一个转录因子，但是对其在食管癌中的功能却知之甚少。本课题发现在食管癌中NS5ATP9的高表达与肿瘤分期、化疗耐受情况、肿瘤复发和总生存期相关。并通过在食管癌细胞系中调控NS5ATP9表达的方法，发现NS5ATP9促进食管癌细胞的增殖且上调细胞周期蛋白A和B的表达，导致G1期细胞的减少。同时NS5ATP9还可以诱导食管癌细胞对铂类化疗药物的抵抗。本课题采用aCGH芯片技术检测到食管癌细胞在NS5ATP9表达情况不同时染色体基因拷贝数的变化情况，发现NS5ATP9的表达可以改变食管癌细胞的染色体稳定性，影响一些与癌症进展有关的基因。另外，在对胃癌细胞及组织的研究中发现，NS5ATP9在胃癌中也存在表达上调的现象，且和肿瘤进展与患者的预后有关。并可促进肿瘤细胞的增殖和侵袭性。而NS5ATP9 mRNA 在胃癌患者的外周单个核细胞（PBMC）中表达也存在上调，并与患者的预后相关。通过以上研究，发现了NS5ATP9作为食管癌肿瘤标志物可能性，为进一步了解NS5ATP9基因的功能和将其应用于临床作为食管癌早期无创诊断标志物提供有益的线索；并且通过构建NS5ATP9交互网络图，对阐明其在食管癌中的作用机制提供有益的线索，为肿瘤基因治疗提供新的靶点。