ANAPC4基因单核苷酸多态性影响类风湿性关节炎易感性的分子机制研究

筛查与类风湿性关节炎(RA)发病相关的单核苷酸多态性(SNP)位点，不仅有助于确定易感人群，用于早期诊断和预防，更重要的意义在于为阐明RA的发病机制提供重要线索。我们前期建立了中国汉族人群RA患者的大样本库，并通过关联研究发现ANAPC4基因内SNP位点rs3816587与RA发病显著相关。生物信息学提示，该位点的突变型形成了一个新的转录因子c-myc结合位点。本项目拟在此基础上，利用EMSA、超滞后分析以及双荧光素酶报告基因检测系统等手段，证实不同基因型与c-myc结合能力不同，进而影响ANAPC4基因表达；再通过RT-PCR和WB检测三种基因型人群滑膜细胞ANAPC4 mRNA及蛋白水平，探索该位点影响RA易感性的作用机制。此外，在ANAPC4基因区域筛查与之紧密连锁的新SNP位点，并作相应功能分析。本研究有望首次将ANAPC4的表达调控与RA相联系，为RA发病机制研究提供新思路。

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)发病机制不明，筛查与RA发病相关的单核苷酸多态性(SNP)位点，不仅确定易感人群，用于早期诊断和预防,更有助于阐明RA 的发病机制提供重要线索，为治疗与预防提供靶点。研究中我们筛查了一系列中国汉族人群的RA易感基因位点，在两个独立样本中均发现NLRP1启动子区的rs878329位点与RA的易感性具有显著关联性。通过双荧光素报告载体系统，证实了该位点参与启动子的表达调控，是一个功能性SNP位点。预测与该位点结合的转录因子，并通过EMSA实验证实，转录因子RUNX-1仅与该RA易感位点野生型等位基因结合。三种不同基因型携带者人群的NLRP1蛋白表达水平具有显著差异，野生型基因型GG携带者的NLRP1表达水平最高。该研究鉴定了一个新的RA易感基因，并阐明了易感位点影响RA易感性的分子机制，发表于Arthritis Rheum (IF = 8.435)。此外，筛查了英国人群与RA具有高度关联的三个多态性位点在中国汉族人群中的分布情况以及与RA易感性的关联研究，发现在中国汉族人群中仅有rs6457617与RA具有显著关联性，是HLA-DQA1*03的标签位点，可作为RA的易感位点，发表于Clin Dev Immunol (IF= 3.064)。为了抑制类风湿性关节炎患者的T细胞的活化与增殖，我们合成了一种可抑制类风湿性关节炎T细胞活化的苯并噻唑类化合物BD750。该化合物可通过抑制JAK3/STAT5信号通路抑制T细胞的增殖，缓解小鼠T细胞介导的迟发型过敏反应（DTH），发表于Br J Pharmacol (IF=4.409)。此外，证实了miRNA-1通过靶向内皮素1抑制肝癌细胞增殖，研究结果发表于Life Sci (IF = 2.527)。对于实验技术方法的建立，已在统计源期刊发表论文两篇(已标注基金号)。3篇类风湿性关节炎研究论文参与了国际学术会议交流。对于ANAPC4基因与RA的关联分析研究数据正在整理与论文撰写中。