YAP基因调控Wnt/β-catenin通路影响口腔上皮细胞癌变的机制研究

课题组前期建立了口腔上皮细胞体外癌变模型，采用基因芯片技术获得了癌变前后的差异表达基因。经过对差异表达基因的分析和验证，将研究聚焦到YAP基因上。本课题拟应用此癌变模型进一步研究YAP基因表达变化对永生化细胞恶性转化的影响和对口腔癌细胞株成瘤能力的影响，模拟肿瘤发生的早期阶段，并在口腔白斑和鳞癌组织标本中进一步验证，深入探讨YAP基因在口腔鳞癌发生发展过程中的作用，及其与口腔鳞癌早期诊断、预后评估的相关性。并进一步探讨YAP基因在口腔上皮癌变过程中调控Wnt/β-catenin信号通路的具体机制。以期为口腔鳞癌发病机制研究、早期诊断、预后评估提供新的思路和依据。

课题组前期建立了口腔上皮细胞体外癌变模型，经过对差异表达基因的分析和验证，将研究聚焦到YAP基因上。本课题旨在深入探讨YAP基因在口腔鳞癌发生发展过程中的作用，及其与口腔鳞癌早期诊断、预后评估的相关性。并进一步探讨YAP基因在口腔上皮癌变过程中调控Wnt/β-catenin信号通路的具体机制。以期为口腔鳞癌发病机制研究、早期诊断、预后评估提供新的思路和依据。.研究发现YAP基因在口腔白斑、口腔鳞癌癌组织表达增高，与淋巴转移、肿瘤分化程度有一定的相关性，且胞核中YAP蛋白的表达高低与患者的5年生存率有明显的相关性。Fra-1蛋白在口腔鳞癌标本中高表达，与淋巴转移有一定的相关性，且在肿瘤的侵袭前缘，Fra-1的表达相对集中。这些结果表明：YAP基因与口腔癌的转移有明显的相关性，可以作为预测肿瘤转移风险高低的分子指标之一；核中YAP蛋白表达有望作为预测口腔癌患者生存率的指标之一。.YAP基因沉默以后，口腔癌细胞生长变缓慢，克隆形成力降低，细胞侵袭、迁移能力变差，裸鼠皮下成瘤能力下降；再次被过表达后，细胞生长、克隆形成、细胞侵袭、迁移能力基本恢复，裸鼠皮下成瘤能力部分恢复。这提示YAP对口腔癌细胞的生长、侵袭、转移起重要的作用。此外，YAP过表达后β-catenin表达也升高，而其下游的cyclinD1、CD44、Fra-1和c-myc基因表达也随之升高。相反，在YAP基因沉默后，β-catenin表达也降低，而其下游的cyclinD1、CD44、Fra-1和c-myc基因表达也随之降低。这些结果表明，YAP可能通过调节β-catenin的表达，从而调节其下游相关基因，对肿瘤细胞的生长、侵袭、转移能力起调控作用。.YAP基因沉默和再次过表达后，β-catenin的mRNA表达水平变化不大，提示YAP不是直接调节β-catenin的mRNA表达。而Axin蛋白在YAP基因被干扰后表达明显下降，提示YAP可能通过调节Axin的表达，从而调节β-catenin的稳定性，使β-catenin降解减少，表达丰度增加，从而调控Wnt/β-catenin通路。.另外，利用肿瘤转移相关qPCR芯片对YAP基因潜在的下游基因进行筛选，发现YAP可能通过调节WAVE1对口腔癌的转移发生作用。这为深入研究YAP基因调节肿瘤转移的具体机制提供新的研究方向，也是我们下一步研究重点。