ATP合成酶在pcos患者胰岛β细胞功能障碍发生过程中机制研究

PCOS患者普遍存在糖和脂肪代谢异常,其并发症糖尿病一直困扰着病人的身心健康。我们前期研究发现PCOS大鼠胰岛β细胞ATP含量及ATP合成酶β亚基表达降低。研究表明ATP合成速率降低可能是多种因素诱导的β细胞胰岛素分泌障碍及凋亡的中心环节。本项目将研究ATPα/β在大鼠胰岛β细胞中的表达水平，采用基因沉默和过表达ATPα/β技术，证实其表达改变介入了PCOS伴2-DM发生过程中胰岛功能障碍的形成。利用腺病毒感染或siRNA干扰在原代培养SD大鼠胰岛及INS-1细胞中过表达或敲减ATPα/β，检测暴露于高糖、高脂及炎症细胞因子环境后β细胞胰岛素分泌功能及凋亡情况。以上实验结果将阐明ATP合成酶核心亚基表达降低导致的ATP合成速率下降是导致PCOS患者胰岛β细胞功能障碍的重要原因，并从特异性调高其表达以改善胰岛功能障碍并阻止β细胞凋亡这个新的角度为防治PCOS患者代谢异常的发生提供重要思路。

本项目执行年限为三年，所有研究内容基本按计划完成。具体完成情况如下：.2010年2月-2010年5月 我们进行了PCOS及PCOS伴2-DM大鼠模型构建的预实验，以及胰岛原代培养技术的培训；.2010年6月-2011年4月 我们成功建立了PCOS及PCOS伴2-DM大鼠模型，并检测了其胰腺组织，子宫体组织以及卵巢组织中ATP合成酶的表达变化，并撰写了中文文章一篇，投稿待发表.2011年9月-2012年11月 我们成功构建了过表达ATP合成酶的ATPase5b 慢病毒，并成功转染至INS-1细胞。检测了NaN3 处理后及处理后再感染慢病毒的β细胞胰岛素分泌功能以及凋亡的变化情况。检测了感染ATPase5b 慢病毒的正常INS-1在高糖、高脂及高炎性因子环境下胰岛素分泌功能及凋亡状况的改变。.本项目的主要研究进展包括以下几个方面：1.成功建立了PCOS及PCOS伴2-DM大鼠模型；2.确定ATP合成酶在PCOS伴2-DM大鼠胰岛中表达下降；.3.进一步验证了ATP合成酶介入PCOS伴2-DM胰岛功能障碍发生的过程；4.验证上调ATP合成酶表达改善了胰岛β细胞抗糖脂毒性及细胞因子毒性的能力。.获得的主要成果如下：1.发表两篇科技论文，其中一篇发表于SCI收录杂志，另一篇发表于国内杂志；2.培养博士生2名；.3.将取得的成果：申请动物专利一份，部分数据整理完成后已撰写完成2篇论文，包括中文和英文各一篇，余下数据尚在整理。