与FOXE13'UTR单核苷酸多态性位点特异性结合的miRNAs与乳突状甲状腺癌危险程度关系研究

Papillary thyroid carcinoma (PTC) is the most common type of thyroid malignancy, including benign and malignant clinical phenotypes. The low expression of forkhead box E1 (FOXE1) is essentially involved in transformation of benign phenotypes to malignant phenotypes. Our previous investigation revealed rs1443434 and rs965513 in FOXE1 3' UTR were associated with PTC. Therefore, we propose hypothesis of this project: miRNAs specific to SNPs of FOXE1 3' UTR contributes to the transformation of benign phenotypes to malignant phenotypes. In this project, we shall validate target-regulating of miRNAs specific to SNPs of FOXE1 3' UTR, providing etiological evidence for PTC. Furthermore, we shall measure the levels of miRNAs specific to SNPs of FOXE1 3' UTR, and investigate those miRNAs as potential biomarker of benign phenotypes and malignant PTC.

乳突状甲状腺癌（PTC）是一种常见的内分泌系统恶性肿瘤。PTC按其侵袭性大致分为高危和低危两大类。叉头盒蛋白E1（FOXE1）表达降低是PTC向未分化型甲状腺癌转变的重要过程。我们发现：中国北方汉族PTC患者FOXE1 3' UTR单核苷酸多态性位点rs1443434和rs965513与PTC风险相关。据此我们提出以下假说：与FOXE1基因多态性3' UTR特异性结合的miRNA的表达差别可能是导致PTC向未分化型甲状腺癌转变的原因。本项目旨在：⑴确证与FOXE1基因多态性3'UTR特异性结合的目标miRNAs的靶向调控作用，为PTC的病因学研究提供证据。⑵通过检测高危和低危的PTC患者以及正常人群血浆中与FOXE1 3'UTR结合的目标miRNA水平，作为PTC不同临床表型的miRNAs标志物，探索针刺检查造成癌细胞扩散等病理检查问题的解决途径，为不同表型的PTC预防和控制提供监测指标。

FOXE1是叉头盒家族的一员，是细胞功能的重要调节因子，在甲状腺癌的发生发展中起着重要作用。然而，miRNAs对FOXE1的靶向调控在乳头状甲状腺癌（papillary thyroid cancer, PTC）中的作用尚不清楚。我们采用TargetScan7.2在线数据库预测了靶向调控FOXE1 3′UTR的miRNA，经过筛选锁定miR-138-5p，并采用荧光实时定量PCR技术和Western blot技术检测了FOXE1和miR-138-5p在PTC中的表达情况，结果发现FOXE1在PTC细胞株TPC-1中表达下调，而与正常对照组相比，miR-138-5p在PTC细胞珠、组织和人群血清样本中表达水平上均上调。采用miR-138-5p抑制剂转染TPC-1细胞后，FOXE1在mRNA和蛋白水平的表达均上升，双荧光素酶报告基因实验进一步证实了miR-138-5p对FOXE1 3’UTR的靶向调控作用。我们进一步研究了miR-138-5p对PTC细胞功能的影响，结果发现miR-138-5p可抑制TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭。此外，我们利用组织芯片数据评估了58例PTC患者miR-138-5p的表达与临床病理特征的相关性，发现miR-138-5p的高表达与PTC的早期发病显著相关。我们的研究结果表明miR-138-5p通过靶向FOXE1从而抑制PTC细胞的增殖、迁移和侵袭，可能是PTC诊断和治疗的潜在循环生物标志物。