羟基类固醇硫酸基转移酶（SULT2B1b）对小鼠非酒精性脂肪肝大部切除后肝脏再生的影响及相关机制研究

Lipid accumulation and impaired regeneration capacity limit the application of fatty liver as donors for living donor liver transplantation. LXRα is an important regulatory factor involved in lipid metabolism and cell proliferation. Turning off LXR-transcriptional pathways is crucial to guaranteeing the requisite intracellular cholesterol levels of regenerating hepatocytes. We have shown that oxysterol sulfotransferase (SULT2B1b) and the product of SULT2B1b decrease lipids and increases hepatic cell proliferation in vitro and in vivo via inhibiting LXRα signaling pathway. Therefore, we hypothesize that SULT2B1b decreases hepatic lipids and promotes fatty liver regeneration after partial hepatectomy (PH) via LXRα signaling. In the present study, firstly, we will investigate the effect of SULT2B1b on fatty liver regeneration after PH in mouse model of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD); secondly, we will explore the role of LXRα in the process above by using LXRα-/- and mouse model; finally, we will confirm the effect of SULT2B1b on fatty liver regeneration by using RNA interference in vitro fatty liver cell model. These results will demonstrate the effect and mechanism of SULT2B1b on fatty liver regeneration.

脂质堆积及再生能力低下制约着脂肪肝作为活体肝移植供体的应用。LXRα是参与脂质代谢和细胞增殖的重要调控因子。小鼠肝脏部分切除术后，LXRα信号通路的关闭对维持细胞内充足的胆固醇水平，保证肝脏再生至关重要。我们以往的研究发现羟基类固醇硫酸基转移酶（SULT2B1b）及其介导的硫酸化反应产物可以通过抑制LXRα信号通路降低体内外脂质水平并促进正常肝细胞的增殖。因此，我们提出SULT2B1b可以通过调节LXRα信号通路，降低脂肪肝内脂质水平并促进脂肪肝细胞再生。基于此，本课题拟在非酒精性脂肪肝小鼠模型中，研究SULT2B1b过表达对脂肪肝大部切除后肝再生的影响；利用LXRα-/-敲基因小鼠，探讨LXRα信号通路在上述过程中的作用；在体外脂肪肝细胞模型中，应用siRNA干扰技术反证SULT2B1b对脂肪肝细胞再生的影响。本课题的研究结果将阐明SULT2B1b在脂肪肝大部切除后再生中的作用及机制。

脂质堆积及再生能力低下制约着脂肪肝作为活体肝移植供体的应用。肝X受体（LXRα）是参与脂质代谢和细胞增殖的重要调控因子。我们以往的研究发现羟基类固醇硫酸基转移酶（SULT2B1b）及其介导的硫酸化反应产物可以通过抑制LXRα信号通路促进正常肝细胞的增殖。因此，我们猜测SULT2B1b可以通过抑制LXRa信号通路促进脂肪肝细胞再生。本研究显示，在小鼠非酒精性脂肪肝大部切除模型中过表达SULT2B1b能够显著提高肝再生率，以及增生关键调控基因（CDC25b, CyclinA2, CyclinB1, Foxm1b, PCNA）和凋亡相关基因（BCL2和TNFa）的表达，同时显著降低LXRa及其下游靶基因（SREBP-1c，ABCA1, ACC1）的表达。敲除了SULT2B1b基因的非酒精性脂肪肝小鼠在肝脏部分切除术后肝脏内增生关键调控基因CyclinA2、 CyclinB1和凋亡抑制基因BCL2的升高水平明显降低，表明肝脏再生能力减弱，而原本脂肪肝细胞再生过程中存在的LXRa信号通路受抑制的效应也明显减弱，表现为LXRa信号通路下游基因SREBP1c、ACC1及FASN的mRNA水平下降不明显。因此，SULT2B1b基因缺失能够显著抑制脂肪肝细胞增生，促进脂肪肝细胞凋亡，是脂肪肝细胞再生过程中的重要调节因子，且该作用可能与抑制LXRa信号通路有关。通过腹腔注射的方法，我们又对肝脏部分切除术的脂肪肝小鼠同时应用LXRa配体TO901317，与对照组相比，LXRa信号通路下游基因SREBP1c和ACC1表达升高，增生指标cyclin B1、FoxM1b及凋亡指标Bcl2、TNFa的表达降低，表明LXRa信号通路激活，肝脏再生受到抑制，而此时再给予Ad-SULT2B1b病毒感染，增生相关基因cyclin A2、cyclin B1、FoxM1b及凋亡相关基因Bcl2、TNFa的表达升高也均受到明显抑制，表明LXRa通路的激活成功阻断了SULT2B1b过表达引起的肝脏增生。因此，SULT2B1b对脂肪肝细胞再生的促进作用与其对LXRa信号通路的抑制效应密切相关。这为将来进一步应用SULT2B1b及其介导的硫酸化反应产物调节脂肪肝再生提供了实验依据。