LBP/CD14结合位点基因多态性与内毒素易感性关系的研究及其拮抗多肽的筛选

基因多态性与内毒素易感性密切相关。LBP/CD14位于脂多糖（LPS）致炎信号通路的上游，且对LPS具有增敏作用，在内毒素性急性肺损伤的发病中居于重要地位。业已证明，LBP在5个位点上存在基因多态性，但其与内毒素易感性的关系尚无研究。我们的前期工作将LBP/CD14结合位点定位于LBP第1299-1332位碱基序列，而该区域具有1306 C>T的基因多态性。因此，我们推测LBP第1306 C>T的基因多态性可能决定了LBP/CD14结合位点的功能，并可显著影响LPS炎症信号通路。为此，本研究拟提取临床内毒素血症患者DNA，采用限制性片段长度多态性法检测LBP 1306 C>T的基因多态性，结合单核细胞LPS信号通路激活状态及临床预后，筛选出内毒素易感性相关的LBP基因型，并以其为底物筛选拮抗多肽，观测该拮抗多肽的体内外抗内毒素活性，以期为内毒素性急性肺损伤的早期预警和防治提供理想的策略。

基因多态性与内毒素易感性密切相关。LBP/CD14位于脂多糖（LPS）致炎信号通路的上游，且对LPS具有增敏作用，在内毒素性急性呼吸窘迫综合征的发病中居于重要地位。业已证明，LBP在60余个位点上存在基因多态性，但其与内毒素易感性的关系尚无研究。我们的前期工作将LBP/CD14结合位点定位于LBP第1299-1332位碱基序列，而该区域及其邻近区域具有10余个基因多态性。因此，我们推测与LBP第1299-1332位碱基序列邻近的基因多态性可能决定了LBP/CD14结合位点的功能，并可显著影响LPS炎症信号通路。为此，本研究提取了323例临床内毒素血症患者DNA，采用限制性片段长度多态性法检测LBP 15个SNP位点的基因多态性，结合单核细胞LPS信号通路激活状态及临床预后，发现LBP的rs2232580 CC基因型联合rs2232617 CT基因型为内毒素易感基因型。并以该基因型LBP为底物筛选拮抗多肽，氨基酸序列为（FPWHFFSPQLRG），通过体内外实验测定了该拮抗多肽的体内外抗内毒素活性。同时我们还对219例具有ARDS高危因素患者的肺损伤评分（LIPS）及5种生化标志物进行了筛选，发现联合LIPS和ANG-2是较好的预测ARDS发生的临床预警指标。有望为内毒素性急性肺损伤的早期预警和防治提供理想的策略。