抑制树突状细胞microRNA-155诱导恒河猴肝移植免疫耐受的作用和机制

The most optimal way to overcome rejection after organ transplantation is to induce immune tolerance. Inflammation leads to activation and maturation of immature dendritic cells (imDC), which accounts for the failure of inducing immune tolerance through dendritic cells (DC). Our study will explore the influence of miR-155 on DC maturation, dysfunction and apoptosis during inflammation, and the mechanism. We will build a liver transplantation model using rhesus monkey, and transfect dendritic cells with lentivirus expressing anti-sense miR-155 to approach the influence on T-lymphocyte dysfunction, shifting of Th1/Th2 immune response, function of regulatory T cells, and immune tolerance. Iflentivirus-miR-155 expresses stably in DC, durable immune tolerance will be possible. Infused DC would travel to specific lymphatic organs, selectively depress antigen-specific T cells to induce targeted immune tolerance without harming normal immunocompetence. Induction of maintained, targeted immune tolerance in primates will shed a light on both basic research and clinical.application of immune tolerance induction after liver transplantation.

寻找诱导免疫耐受的新方法，是克服移植排斥反应的最佳途径。机体处于炎症背景下,可以使未成熟树突状细胞（imDC）活化、成熟，是很多通过树突状细胞（DC）诱导免疫耐受方案失败的重要原因。本课题研究miR-155在炎症反应引起DC成熟、DC功能异常及DC凋亡过程中发挥的作用和机制。建立恒河猴肝移植模型，体内实验研究抑制树突状细胞miR-155信号诱导恒河猴肝移植免疫耐受的作用，研究T淋巴细胞无能、Th1/Th2型免疫应答的偏移以及调节性T细胞在诱导免疫耐受过程中所起作用。反义miR-155慢病毒在树突状细胞内如能稳定表达，则有可能诱导持久免疫耐受；外源性DC进入动物体内会迁移至特定淋巴器官，遭遇并选择性抑制抗原特异性的T细胞导致免疫耐受，避免了对机体正常免疫能力的损害，具有作用的靶向性。在非人灵长类动物上诱导具有靶向性的持久免疫耐受将具有重要的理论意义及临床应用前景。

背景：寻找诱导免疫耐受的新方法，是克服移植排斥反应的最佳途径。机体处于炎症背景下,可以使未成熟树突状细胞（imDC）活化、成熟，是很多通过树突状细胞（DC）诱导免疫耐受方案失败的重要原因。主要研究内容：本课题研究miR-155在炎症反应引起DC成熟、DC功能异常及DC凋亡过程中发挥的作用和机制。建立恒河猴移植模型，体内实验研究抑制树突状细胞miR-155信号诱导恒河猴移植免疫耐受的作用，通过诱导恒河猴外周血未成熟树突状细胞影响共刺激分子的表达、辅助T分子(Th)1和2的平衡、JAK/STAT/SOCS信号通路蛋白的表达来探讨反义miR155的作用。重要结果：1、anti-miR155能够抑制DC成熟，并抑制T淋巴细胞增殖，抑制Th1促炎因子，增强Th2抗炎反应，显示一定的免疫耐受特性。2、imDCanti-miR155诱导Treg细胞扩增，促进Treg的诱导分化，降低Th1、Th17细胞的分泌；增强Th2的抗炎作用。3、imDCanti-miR155延长了恒河猴皮肤移植的存活时间，炎症细胞浸润明显减轻,缓解了移植皮片后的免疫排斥反应。imDCanti-miR155可能通过减弱Th1、Th17免疫效应来缓解恒河猴皮肤移植排斥反应，使移植物存活时间延长。4. SOCS1作为anti-miR155最为重要的靶基因，anti-miR155通过调控SOCS1的表达,抑制 JAK/STAT 信号通路的活化,从而改变T细胞的凋亡、增殖等生物学效应,抑制Th1细胞分化，促进Th2，最终影响免疫排斥的发生发展。imDCanti-miR155介导的免疫耐受同SOCS1 /JAK/STAT信号通路相关。研究意义：机体处于炎症背景下在活体内感染、缺血再灌注等多种因素可以使 imDC 活化、成熟，这是很多通过树突状状细胞诱导免疫耐受方案失败的重要原因，imDCanti-miR155能抑制 imDC 在体内的活化,从而获得稳定的 imDC；虽然小鼠等啮齿类动物和人类在基因背景上相似度很高，但免疫系统差异巨大，这也是在啮齿类动物模型上取得良好效果的诱导imDC方案却难以在灵长类动物模型上诱导出同样理想的持久免疫低反应的重要原因，在非人灵长类动物上研究imDCanti-miR155诱导移植免疫耐受的作用和机制将具有重要的理论意义及临床应用前景。