荞麦芦丁降解酶的基因克隆与多克隆抗体制备

以西北地区重要的杂粮作物荞麦为材料，通过层析的方法纯化芦丁降解酶，测定N-端的氨基酸序列，设计简并引物，通过RT-PCR和5ˊRACE获取芦丁降解酶的全长基因，并对芦丁降解酶进行原核表达和纯化，纯化的芦丁降解酶免疫动物制备芦丁降解酶的多克隆抗体，并用多克隆抗体大量筛选低芦丁降解酶活性的荞麦种质。该研究可填补国际上关于芦丁降解酶分子生物学研究的空白和薄弱环节，对于荞麦的高芦丁育种有重要的应用价值，同时为揭示荞麦芦丁降解酶的生物学功能奠定了坚实的基础，为进一步通过反义技术提高荞麦籽粒芦丁的含量作好了准备工作。