(P)RR介导MAPK信号通路对心肾综合征联动作用及益气温阳、活血利水治则机制研究

ACEI and ARB were forbiden when renal function deteriment severity,because of lower renal perfusion pressure. Accordingly,non-AngII pathway of renin-angiotensin-aldosterone-system (RAAS) paly a vital role in treating chronic cardiac failure.. The non-AngII function of the prorenin receptor(PRR) can provoke mitogen-activated protein kinase signal channel(MAPK),and stimulate kidney injury.But PRR how to mediate cardiorenal syndrome (CRS) was unknown.. "invigorate qi and warm yang,promote blood and promote diuresis"was the basic curative principles based on "deficiency in origin and excess in superficiality".P ast study indicate,this principles take advantage to renal failure. We want to prove PRR was the associated agent to CRS,and prove MAPK signal channel mediated by PRR play a pivotal role of the curative principle.The results can provide reference to clinical medication.

当慢性心衰合并肾功能中度损害（血清肌酐>330umol/L）时，血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）与受体拮抗剂（ARB）由于进一步降低肾灌注压而加重肾脏损害被列为使用禁忌，这是由于AngII对肾小球灌注压和跨膜压的作用结果。因此，寻找独立于AngII环节之外的RAAS新作用机制可为心衰治疗开创新局面。.肾素原受体(P)RR被证明是RAAS上游受体的新成员，具有非AngII依赖功能，可介导MAPK信号通路促进肾脏纤维化病变。但该功能在心肾综合征的发病机制的具体作用尚未见明确报道和数据支持。.益气温阳、活血利水是依据慢性心衰本虚标实的病因病机确立的基本治则。既往实验表明该治法对肾衰具有治疗优势。本研究旨在证实(P)RR是心肾共损的联动因子的基础上，进一步求证以参附强心丸为代表的益气温阳、活血利水法是通过(P)RR介导MAPK信号通路，通过非AngII依赖途径抑制心肾共损，为临床提供用药依据。

项目背景：本项目旨在证实肾素原受体（PRR）是心肾共损的联动因子的基础上，并进一步求证以参附强心丸为代表的益气温阳、活血利水是通过PRR介导MAPK信号通路的非AngII依赖途径抑制心肾共损的作用机制。.主要研究内容：1、采用腹主动脉缩窄术合并急性肾脏缺血再灌注损伤（ACC+RIRI）法制备大鼠心肾综合征模型，验证了参附强心丸通过抑制PRR介导MAPK信号通路激活，在非AngII依赖途径抑制了心肾衰竭。2、腺嘌呤合并左冠状动脉结扎（Adeni+AMI）制备大鼠肾阳虚心梗模型，观察PRR与水通道蛋白2（AQP2）在“下丘脑—垂体—靶腺”轴的表达情况，以说明该环节在温阳利水治则中对心肾阳虚证候的作用。.重要结果：1、参附强心丸通过减少心室肌和肾脏组织PRR mRNA表达，抑制MAPK信号通路p-ERK1/2，p-P38，p-JNK蛋白表达，改善心肾组织细胞凋亡，从而对心肾起到保护作用。2、PRR在心脏、肾脏、下丘脑均有表达，相比较在肾脏表达更强。PRR免疫荧光表达于肾远端集合管细胞，AQP2与PRR染色于不同的细胞类型，而AQP2与PRR在下丘脑染色位置相同。.关键数据：1、参附强心丸组大鼠左心室和左肾PRR mRNA表达明显减少，对心室肌p-P38和肾脏组织p-P38、p-JNK、p-ERK1/2的抑制作用明显，有效降低CRS大鼠心肾细胞凋亡率，Bax平均灰度值明显增加，Bcl-2灰度值明显减少，表明抗凋亡基因Bcl-2阳性增强，促凋亡基因Bax阳性减弱。2、免疫荧光下可见PRR表达为荧光绿色，Adeni+AMI术后，PRR荧光绿色明显增强，尤其以肾脏最明显，但与AQP2表达不同位，而在下丘脑中，PRR与AQP2染色位置相同，PRR的荧光绿色与AQP2荧光红色重合为黄色。参附强心丸组心脏PRR（荧光绿色）表达较模型组较减少，肾脏AQP2（荧光红色）表达减少，下丘脑PRR与AQP2与其他组表达未见明显差别。.科学意义：1、与临床所用ACEI和ARB不同，PRR的作用特点是非AngII依赖的，即不存在AngII对肾小球灌注压和跨膜压的负反馈导致的副作用，本实验证实了参附强心丸可通过抑制PRR起到保护心肾的作用，这为临床提供用药依据。2、关于PRR与AQP2的表达实验为今后的研究提出启示，即PRR与AQP2在下丘脑的共表达对阳虚水泛机制研究是较为有意义的研究靶点。