基于CTGF-LRP通路探讨心肾综合征心肾联动机制及益心解毒方的干预作用

Type 2 CRS is characterized by chronic abnormalities in cardiac function causing progressive chronic kidney disease. Currently, the mechanism of heart - kidney crosstalk is unclear. Connective tissue grouth factor is one of the key factors during kidney and heart fibrosis. Our previous study showed that plasma CTGF were significantly increased at early stage of CHF in LAD ligation rats, which suggested that the soluble CTGF may get into the kidney with the blood flow and induce renal interstitial fibrosis after combination with its receptor (LRP). There for, CTGF may play a key role in heart-kidney cross talk in CRS. TCM theory holds that disharmony between heart and kidney is the major cause of CRS. The key principle of Chinese medicine intervention was heart-kidney coordination, and the therapies were focus on warming yang, promoting blood, inducing diuresis and so on. Yixinjiedu detection which meet with the heart-kidney coordination theory and effective in CHF treatment was used in this study to investigate the mechanism of heart-kidney cross talk from whole, tissue, and cellular level base on CTGF-LRP pathway, in order to clarify the mechanism of Yixinjiedu detection, and provide new target of CRS treatment.

Ⅱ型心肾综合征（CRS）是由慢性心功能异常诱发慢性肾脏疾病导致的心肾共病，目前影响病程进展的心肾联动作用机制尚未完全阐明。结缔组织生长因子（CTGF）是心、肾纤维化的关键因子。课题组前期研究发现，大鼠慢性心力衰竭（CHF）早期血浆中CTGF显著增高，提示其可能随血液循环进入肾脏与其受体LRP结合后诱发肾间质纤维化，进而成为CRS心肾联动心病及肾的关键物质基础之一。中医学者认为CRS的核心病机是心肾不交，交通心肾为中医干预CRS的主要原则，具体治法集中于温阳、活血、利水等方面。本研究拟从CTGF-LRP通路入手，以前期治疗CHF疗效确切，具有交通心肾作用的益心解毒方为载体，从整体、组织、细胞水平深入研究CTGF在CRS心肾联动中的作用，部分阐明益心解毒方治疗CRS的分子机制，为CRS的药物治疗提供新的靶标。

Ⅱ型心肾综合征（CRS）是由慢性心功能异常诱发慢性肾脏疾病导致的心肾共病，目前影响病程进展的心肾联动作用机制尚未完全阐明。本研究应用LAD结扎致大鼠心肌缺血后CHF模型，从CTGF-LRP通路入手结合细胞实验，采用免疫组化、原位杂交、Western-blot、realtime-PCR等方法，从整体、组织、细胞水平深入研究CTGF在CRS心肾联动中的作用。本研究建立了稳定的动物实验模型，以含有黄芪、丹参等的复方颗粒益心解毒方为主要干预药物，进行了药效评价与药理机制的研究。结果显示：术后7天、28天、60天模型动物均存在心功能和肾脏血流动力学改变。术后28天可见肾脏组织发生肾小管上皮细胞表型改变和少量细胞外基质沉积。术后60天病理改变更为显著，同时检出肾功能相关血生化指标改变。血浆CTGF水平术后7天呈升高趋势，术后28天显著升高。各时间点均未见尿液CTGF含量显著改变。肾脏局部CTGFmRNA、CTGF蛋白、LRP蛋白水平在术后28天和60天显著升高。福辛普利钠和益心解毒方治疗均能够显著改善模型大鼠心功能，并在一定程度上改善肾脏血流动力学指标。益心解毒方对心功能的改善优于福辛普利钠，对肾脏血流动力学的改变作用与福辛普利钠组比较无显著差异。肾脏组织病理学及免疫组织化学法观察发现，与福辛普利钠比较，益心解毒方组能够更为有效地降低CTGFmRNA、CTGF蛋白、LRP蛋白表达水平，抑制肾小管上皮细胞转化和细胞外基质沉积，延缓模型动物II型心肾综合征进程。可见，血流动力学改变是心力衰竭诱发肾功能异常的重要病理生理因素，但在CRS疾病进展过程中，仍有其他机制发挥作用，有待进一步深入研究。本课题细胞实验进一步研究发现，益心解毒方能够抑制CTGF诱导的肾小管上皮细胞表型转化和细胞外基质成分蛋白表达。可见，CTGF-LRP通路是益心解毒方防治II型心肾综合征的靶标。本课题成功复制了II型心肾综合征大鼠模型，确证了CTGF在CRS心肾联动中的重要作用，同时，从CTGF-LRP通路入手，探讨了益心解毒方治疗CRS肾间质纤维化的作用机制，为CRS心肾相交理论提供实证基础，为该疾病的药物治疗提供新的靶标。