温阳活血利水法对TGF-β-Smads信号通路介导糖尿病心肌重构的效应机制

The myocardial remodeling is the key pathophysiological basis to diabetic cardiomyopathy (DCM), and leads mainly deadly cause of diabetic complications. So it is the clinical significance of broad interest.Preliminary studies of our group have confirmed the treatment of Wenyanghuoxuelishui exact effect on coronary heart disease and heart failure. And then some studies have shown that TGF-β1-Smads signal pathway is involved in the pathology of DCM myocardial remodeling process. This subject from the TGF-β1-Smads signaling pathway mediated downstream of expression of CTGF, MMPs, TIMPs, type I and III collagen abnormalities cause DCM myocardial remodeling perspective by copying the DCM rat model using immunoprecipitation, Western Blot, ELISA, RT-PCR, immunohistochemical methods to detect rat serum and myocardial tissue TGF-β1, Smad2, 3,4,7, and the expression of TβR-I, II, TβRII-TGF-β1-TβRI complexand and CTGF of MMP2, 9, TIMP1, the I and type III collagen protein expression changes, in order to explore the molecular mechanisms of TGF-β1-Smads mediated DCM myocardial remodeling,and Chinese medicine prevention and Treatment of DCM providesobjective basis of the treatment of Wenyanghuoxuelishui.

心肌重构既是糖尿病心肌病(DCM)发生的关键病理生理基础，也是糖尿病并发症死亡的主要原因，其临床意义广受关注。本课题组前期研究证实温阳活血利水法对冠心病及心衰有确切疗效。研究表明TGF-β1-Smads信号通路参与DCM心肌重构的病理进程。本课题从TGF-β1-Smads信号通路介导下游CTGF、MMPs、TIMPs、I、III型胶原表达异常导致DCM心肌重构的角度出发，通过复制DCM大鼠模型，运用免疫共沉淀技术，Western Blot，ELISA，RT-PCR，免疫组化法检测药物干预后的大鼠血清及心肌组织TGF-β1，Smad2、3、4、7，TβR-I、II、TβRII-TGF-β1-TβRI复合物，及信号通路下游CTGF，MMP2、9，TIMP1，I、III型胶原蛋白的表达变化，以此探讨TGF-β1-Smads介导DCM心肌重构的分子机制，为中药温阳活血利水法防治DCM提供客观依据。

心血管病变是糖尿病患者的主要死亡原因，约80%的糖尿病患者死于心血管并发症。糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)是一种与大血管和冠状动脉病变无关的特异的心肌病，是糖尿病的一个独立并发症。 心肌重构既是糖尿病心肌病(DCM)发生的关键病理生理基础，也是糖尿病并发症死亡的主要原因，其临床意义广受关注。.本研究从TGF-β1/Smads信号通路介导下游CTGF、MMPs、TIMPs、I、III型胶原表达异常导致DCM心肌重构的角度出发，通过复制DCM大鼠模型，运用免疫共沉淀技术，Western Blot，ELISA，免疫组化法检测药物干预后的大鼠血清及心肌组织TGF-β1，Smad2、3、4、7，TβR-I、II、TβRII-TGF-β1-TβRI复合物，及信号通路下游CTGF，MMP2、9，TIMP1，I、III型胶原蛋白的表达变化，以此探讨TGF-β1-Smads介导DCM心肌重构的分子机制，为中药温阳活血利水法防治DCM提供客观依据。.实验结果显示：DCM模型组大鼠心肌组织TGF-β1，Smad2、Smad3、Smad4、TβR-I、TβR-II、CTGF，MMP2/9，TIMP1，I、III型胶原表达水平较空白组升高及Smad7表达下调，药物干预后，各组大鼠心肌组织TGF-β1，Smad2、Smad3、Smad4、TβR-I、TβR-II、CTGF，MMP2/9，TIMP1，I、III型胶原表达均有不同程度降低，Smad7有不同程度升高。中药中剂量组对上述指标干预效果与西药组比较，无统计学意义（P>0.05）。透射电镜观察显示正常组大鼠心肌细胞超微结构正常，肌纤维排列整齐规则紧密，肌小节较清晰，线粒体较丰富。模型组大鼠心肌纤维排列较紊乱，部分肌纤维破坏，肌小节破坏，线粒体较少，胞浆内有空洞。中药高、中剂量组、西药组大鼠心肌纤维排列较紧密，肌小节较清晰，线粒体较丰富，偶见肌纤维排列松散。中药低剂量组大鼠部分心肌纤维排列紊乱，肌小节破坏，肌纤维破坏，线粒体较少。中药强心合剂具有抗氧化应激，降低炎症因子表达，减轻心肌纤维化，改善心脏功能。