以人鼻咽癌细胞株和LCM纯化的鼻咽癌细胞为研究样本,以p53蛋白为目标靶,采用靶向蛋白质组学技术,分离、鉴定鼻咽癌细胞中p53蛋白聚集时的相互作用蛋白;免疫共沉淀-Western blot和免疫荧光双标记激光共聚焦显微镜观察等方法验证其与p53蛋白之间的相互作用,生物传感芯片技术确定其与p53蛋白之间的动态结合解离过程;继而,采用RNA干扰技术剔除鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白的表达,观察剔除p53相互作用蛋白后p53蛋白分子网络的改变,以及p53的转录调控功能、细胞周期和抑瘤功能的改变,反向验证p53相互作用蛋白的功能,筛选出导致鼻咽癌中p53蛋白功能失活的p53相互作用蛋白。项目研究结果不仅有助于揭示鼻咽癌细胞中p53蛋白功能失活的分子机理,而且为阐明p53蛋白在鼻咽癌中的作用提供新的依据和线索,具有十分重要的理论和实际意义。
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数据更新时间:2023-05-31
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