C型利钠肽介导内皮依赖性超极化因子样舒张作用及其机制的研究

高血压病的发生发展与内皮依赖性超级化因子(EDHF)的异常有关，但EDHF的身份和作用机制目前仍不明确。C型利钠肽(CNP)是由内皮释放，并能导致血管平滑肌超极化和舒张，其特点与EDHF相似，因而CNP作为EDHF的候选者已成为目前研究的热点。我们在预实验中观察到阻断CNP作用后，EDHF所导致的人肠系膜小动脉舒张反应减弱，提示CNP可能参与EDHF对该血管的调节活动。在本课题中，我们拟采用形态学、电生理学和分子生物学等方法技术，进行离体血管环-细胞-离子通道三个水平的研究，在已有研究基础上，进一步明确：①CNP是否作为一种EDHF调节人肠系膜小动脉活动；②CNP对人肠系膜小动脉作用的受体，信号通路是什么；③CNP对人肠系膜小动脉作用的离子通道机制。本课题对于揭示人阻力血管舒张机制和EDHF的身份和作用机制有重要意义，同时也为高血压等血管疾病的发病机理和防治提供新的研究策略。

高血压病的发生发展与内皮依赖性超级化因子(EDHF)的异常有关，但EDHF的身份和作用机制目前仍不明确。C型利钠肽(CNP)是由内皮释放，并能导致血管平滑肌超极化和舒张，其特点与EDHF相似，我们实验的目的就是明确CNP是否作为一种EDHF调节人动脉的活动及其作用的离子通道机制。我们通过测定血管环张力实验发现在清除CNP后，Ach诱导的EDHF样舒张作用减弱，提示CNP可作为一种EDHF调节人动脉的活动。PCR和免疫组化实验证实在人动脉上存G蛋白门控内向整流钾通道（GIRK）的表达。在血管环张力测定实验中，分别阻断GIRK和大电导钙激活钾通道（BKCa）均减弱了CNP对血管的舒张作用；通过膜片钳实验进一步发现CNP能分别增加GIRK和BKCa通道的离子电流幅度。在血管环张力测定实验中，我们发现人血管的内皮依赖性舒张作用与年龄呈负相关，而采用实时定量PCR实验发现血管内皮细胞上与内皮依赖性舒张作用相关的物质CNP，eNOS和CSE的mRNA随年龄的增长而降低，而从解释了人血管内皮依赖性舒张作用随年龄降低的原因。实验结论：CNP是作为一种内皮依赖性超级化因子EDHF舒张人动脉； CNP可通过作用于对GIRK和BKCa通道对人动脉起到舒张作用；人动脉的内皮依赖性的舒张活动与人年龄呈负相关，其机制可能与内皮产生的CNP，NO和H2S这些舒张血管的物质相关。