E3连接酶ZNRF1表达抑制:PAX5突变导致B细胞急淋的一种机制?

PAX5 is important altered in B-cell acute lymphoblastic leukemia (ALL), takes part in leukemogenesis, and would be the target for therapy in ALL. Complexity of PAX5 alterations blocks the advancement of PAX5 targeted therapy. We found cases of PAX5 alterations had same gene expression signatures, and this hints PAX5 downstream genes would be the target for therapy in PAX5 alterations ALL. Using bioinformatical methods, we characterized one E3 ligase, ZNRF1, which is not known in cancer research. ZNRF1 regulates neuritogenesis via tubulin and AKT. We hypothesize that ZNRF1 may take part in leukemogenesis of ALL with PAX5 alterations. We study the role of ZNRF1 in leukemogenesis of ALL with PAX5 alterations, and this will provide new strategy for ALL.

PAX5突变是B急淋重要的发病因素，PAX5突变种类多，限制了针对PAX5突变的靶向治疗。芯片信息分析说明:尽管PAX5突变种类多,但PAX5突变具有类似的基因指纹，PAX5下游靶基因有可能成为多种PAX5突变的治疗靶点。ZNRF1是我们筛选的PAX5突变的下游靶基因，目前对ZNRF1的认识有限，对其在肿瘤发生中的作用没有研究。目前研究认为ZNRF1 作为E3连接酶，可通过调控AKT和微管蛋白参与神经细胞的再生。我们认为：在PAX5突变的B急淋中，ZNRF1表达下降通过调控AKT和微管蛋白，参与急淋发生，通过上调ZNRF1表达对PAX5突变的急淋有靶向作用。本项目通过体内外实验研究上调ZNRF1表达对PAX5突变急淋的作用，并阐明ZNRF1缺失在急淋发生的机制。完成该项目，将加深对ZNRF1的认识，进一步阐明PAX5突变导致急淋的机制，为PAX5突变急淋的靶向治疗提供新策略。

本项目的研究目的是明确ZNRF1基因表达抑制是否是PAX5突变导致B细胞急淋的一种机制。为完成该项目，我们完成以下两方面工作：1 研究ZNRF1对肿瘤的生物行为影响。2 明确ZNRF1是否是PAX5突变的下游靶基因。我们采用ZNRF1表达质粒和ZNRF1的siRNA处理白细胞细胞株NB4细胞，结果显示ZNRF1过表达抑制白血病NB4细胞的增殖 ，抑制白血病干细胞，其中机制可能通过AKT及STAT5信号通路。为了明确ZNRF1是否是PAX5突变的下游靶基因。我们构建PAX5单倍体缺失的RAJI细胞，REH细胞及A20细胞。结果PAX5缺失不改变ZNRF1基因表达，说明ZNRF1表达抑制不是PAX5突变导致B细胞急淋的一种机制。但是我们通过对PAX5突变导致的基因表达分析提示PAX5突变通过影响基因组不稳定，免疫耐受及肿瘤信号通路基因参与白血病发生。同时研究发现PAX5突变导致肿瘤细胞休眠可能是PAX5突变急淋发生和复发的原因。