hTERT永生化肝细胞系的建立及其生物学特性研究

各种原因引起的肝功能衰竭是威胁人类健康的重要原因之一，虽然原位肝移植是目前治疗肝细胞衰竭的有效手段，但却严重受到捐献器官短缺、手术费用高等限制。随着细胞生物学的发展，生物人工肝支持系统作为治疗肝功能衰竭的方法，正日益受到人们的重视，但目前尚缺乏一个令人满意的细胞系，因而建立功能成熟稳定的人源肝细胞系成为目前迫切需要解决的问题。本课题以pcDNA 6/TR为载体，克隆、构建表达hTERT序列侧翼带有同向LoxP位点的重组质粒，通过转染成人原代肝细胞，经筛选，克隆，建立能够连续传代的功能稳定的永生化人源肝细胞系；并利用噬菌体P1的Cre-Lox重组系统，在特定的时间删除LoxP位点间的hTERT基因序列，以人为控制基因表型，争取解决生物人工肝支持系统治疗的肝细胞来源短缺问题。