MSC源性外泌体对系统性红斑狼疮中Tfh/Tfr细胞“漂移”的调控作用和机制研究

Follicular helper T cells (Tfh) play an important role in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE). Our previous studies have confirmed that the Tfh are amplified in lupus, and it can be used as a therapeutic target. Follicular regulatory T cells (Tfr) can negatively regulate Tfh, so the regulation of Tfh and Tfr balance is beneficial to SLE remission. Mesenchymal stem cells (MSC) can be used as a new way for the treatment of SLE. We have confirmed that MSC can inhibit Tfh and alleviate lupus injury. In recent years, the exosome produced by MSC may be the key to the treatment of MSC. The purpose of this study is to explore the therapeutic effect of MSC derived exosome on Tfh and Tfr balance “drift” in lupus. First, SLE patients and MRL/lpr lupus mice were used to determine the regulatory role of MSC derived exosome on the differentiation and drift of Tfh and Tfr cells; Further, next generation sequencing technology is used to sequence the key genes that regulate the differentiation of Tfh and Tfr by exosome; Finally, we plan to verify the regulatory role of selected genes on Tfh and Tfr and the therapeutic potential for lupus. This study can help to clarify the regulatory effect and mechanism of MSC derived exosome on the drift of Tfh and Tfr in lupus. It is expected to find new therapeutic methods and targets for the treatment of lupus.

滤泡辅助性T细胞（Tfh）在系统性红斑狼疮（SLE）发病中发挥重要促进作用，我们前期证实SLE中Tfh扩增，可作为治疗靶标。滤泡调节性T细胞（Tfr）可负向调控Tfh，故调控Tfh和Tfr平衡可利于SLE缓解。间充质干细胞（MSC）可作为治疗SLE的新手段，我们前期证实MSC可抑制Tfh并缓解狼疮发病。近年研究MSC产生的外泌体可能是MSC发挥治疗的关键。本课题拟探讨MSC源性外泌体调控Tfh和Tfr平衡“漂移”对狼疮的治疗作用。首先通过SLE患者和MRL/lpr狼疮鼠明确MSC源性外泌体对Tfh和Tfr分化和漂移的调控作用；进一步高通量测序外泌体调控Tfh和Tfr分化的关键基因；然后体内外验证筛选到的基因对Tfh和Tfr的调控作用和对狼疮的治疗潜力。本课题可帮助明确MSC源性外泌体对狼疮中Tfh和Tfr漂移的调控作用和机制，有望为狼疮治疗发现新方法和新靶点。

本项目基于系统性红斑狼疮是临床中常见的自身免疫病，效应性T淋巴细胞亚群的异常是狼疮中重要的临床特点及重要的发病机制，其中滤泡辅助性T细胞和滤泡调节性T细胞在狼疮的发病中具有重要的意义，两个细胞亚群的失衡导致狼疮的发生及疾病活动度的增加。而目前狼疮的临床治疗中，除外传统的激素及免疫抑制剂，近年来靶向B细胞为主的生物制剂也具有一定的治疗作用，但临床中狼疮患者异质性较大，部分患者病情反复，部分治疗需求仍未得到满足。间充质干细胞作为狼疮治疗的新手段，我们既往的研究结果证实间充质干细胞可通过抑制Tfh缓解狼疮发病，但干细胞的研究存在一定的质疑及局限，因此在本课题中我们进一步关注到间充质干细胞来源的外泌体，通过外泌体承载干细胞的功能且规避干细胞的风险。通过本项目的支持，我们首先明确了临床SLE患者外周血中流式检测Tfh细胞亚群与狼疮疾病活动度呈负相关性，并在传统MRL/Ipr狼疮鼠模型的基础上进一步复制公认的狼疮动物模型（咪喹莫特诱导的狼疮鼠模型），在咪喹莫特狼疮鼠模型中进一步明确Tfh/Tfr细胞亚群的动态变化，在明确Tfh/Tfr细胞亚群在咪喹莫特狼疮鼠模型中的变化后，通过狼疮鼠脾脏中直接分选Tfh/Tfr细胞亚群，以及分选Naïve T淋巴细胞后体外诱导分化mimic Tfh/Tfr细胞，将exosome分别加入直接分选的Tfh/Tfr细胞系统及间接体外培养的mimic Tfh/Tfr细胞系统，明确exosome对狼疮中Tfh/Tfr细胞的调节作用并进一步通过质谱分析，筛选exosome对狼疮中Tfh/Tfr细胞调节的靶点蛋白及重要的信号通路，为干细胞来源的外泌体治疗狼疮提供重要的研究基础。