宫颈癌相关Twist依赖型基因标签的建立及临床意义

The prognostic value of high-risk HPV types, clinicopathological parameters and single-molecule labels in cervical cancer are still uncertainties. Therefore, studying gene differential expression profiles from cervical cancer tissues with various prognosis will help to explore its internal mechanism. Analysis of these differentially expressed genes formed gene tags can define tumor heterogeneity among patients with cervical cancer, has a guide to develop individual treatment programs. Preliminary studies showed that the twist functioned important roles on cervical cancer invasion and metastasis; lentivirus-mediated twist protein deficiencies are quite different impact on survival of different cervical cancer cell lines, so the underlying causes of different dependence of various cervical cancer cell lines on twist needs further study. Through the twist dependency index (TDI), this study pursues to quantify the different cervical cancer cell dependence on twist; identify these twist-dependent genes, construct twistdependent gene tags and elucidate their roles in invasion and metastasis and epithelialmesenchymal conversion (EMT) of cervical cancer cells and the clinical predictive value. Therefore, the confusion with specificity of twist as a single prognostic indicator can be avoided, and there are more likely to provide some experimental evidences for studying cervical cancer prognosis predictive systems.

目前高危HPV亚型、临床病理参数及单一分子标签在宫颈癌中的预后价值存在不确定性。因此，对预后不同宫颈癌组织进行基因表达谱的差异分析将有助于探寻其内在机制。分析这些差异基因所形成的基因标签，可判定宫颈癌患者间的肿瘤异质性，对制定"个体化"预测或治疗方案有着指导意义。前期研究表明twist是影响宫颈癌侵袭转移的关键分子标签；慢病毒介导的twist蛋白缺失对不同宫颈癌细胞生存的影响存在较大差异，宫颈癌细胞对twist的依赖程度差异的内在原因有待进一步研究。本课题通过twist依赖指数（TDI）量化不同宫颈癌细胞的twist依赖程度；明确twist依赖型基因,建立twist依赖型基因标签，并进一步明确其在宫颈癌细胞上皮-间质转化（EMT）与侵袭转移中的作用。本研究不仅在理论上有助于补充和深化对EMT的理解，更有望为其他新型宫颈癌预后分子的研究提供一些试验性的探索。

研究背景：宫颈癌是全球妇女第二大恶性疾病。近几年LCT联合HPV检测已大大提高了宫颈癌前病变的检出率，手术及同步放化疗疗效满意，但仍然有部分患者发生浸润转移,预后不良。越来越多的研究表明上皮间质转化(EMT)其参与上皮性肿瘤的癌变过程，是肿瘤浸润及转移的先决条件；而Twist 蛋白对胚胎发育过程中的细胞重建及细胞迁移发挥着重要作用。然而，Twist 在宫颈癌EMT中的调控作用，目前尚属未知。本研究以Twist为中心，观察其在宫颈癌发生、浸润及EMT中作用和分子机制，为临床提供更有效地评估宫颈癌的进展和预后的分子指标奠定基础.研究方法：观察Twist蛋白在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中的表达情况；采用shRNA技术，观察Twist蛋白在宫颈癌细胞系增殖特性中的作用；采用Letivirus技术，观察Twist蛋白在宫颈癌细胞系迁移和浸润中的作用；探讨Twist蛋白促进宫颈癌细胞的EMT作用的可能分子机制。.结果：免疫组化检测发现，正常宫颈组织与CIN I、CINII-III、癌组织相比，Twist表达具有明显差异（P<0.01）；但在CIN I组与癌组织中Twist表达无明显差异（P>0.05）。在宫颈癌细胞中Twist沉默后，显著抑制细胞运动；过表达后，细胞运动能力回复。此外，Twist可通过调节TGFβ-smad3信号介导EMT。.结论：Twist作为宫颈癌细胞EMT关键调控分子，参与癌变过程。