nNCBT在雌性生殖中作用的研究

SLC4基因家族的钠离子偶联碳酸氢根转运蛋白NCBT-包括生电性的eNCBT和电中性的nNCBT-是机体主要的pH调控蛋白及碳酸氢根离子跨膜运输的主要载体。碳酸氢根对于雌性生殖道中发生的精子获能及顶体反应非常重要，从而对于受精过程起着重要作用。在前期研究中，本人从事了大量关于NCBT分子生理学的工作，包括新cDNA的克隆、表达分析和分子生理学功能的研究。在本课题中，我们将进一步把对NCBT的研究扩展到生殖学领域，探究nNCBT在雌性生殖中的表达及生理学作用。研究内容：（1）在mRNA及蛋白水平上研究nNCBT在雌性生殖道上皮细胞中的表达，及所表达的剪切异构体；（2）以蛙卵为表达体系，以电生理学技术为主要手段，研究nNCBT剪切异构体的分子生理学活性；（3）利用基因敲除小鼠，研究nNCBT与雌性生殖的生理学相关性。本研究的结果将对于认识雌性生殖道碳酸氢根的分泌机制以及雌性不育具有重要意义。

SLC4基因家族的钠离子偶联碳酸氢根转运蛋白NCBT是机体主要的pH调控蛋白及碳酸氢根离子跨膜运输载体。碳酸氢根对于雌性生殖道中发生的精子获能及顶体反应非常重要，从而对于受精过程起着重要作用。本课题主要研究电中性nNCBT在雌性生殖道中的表达及生理学作用。.在课题的研究过程中，我们主要在以下三个方面取得了比较重要的进展：.（1）NCBT的功能基因组学.对编码NBCe1，NBCn1及NBCn2的基因在雌性小鼠生殖道组织及其他组织中表达产物的多样性进行了比较系统的研究，发现并克隆关于NBCe1，NBCn1和NBCn2的一系列新的表达产物异构体形式（在GenBank发表cDNA序列34个），大为丰富了我们关于对这些重要基因的表达产物多样性的认识。.（2）HCO3–转运体在雌性生殖道组中的表达分布及生理学作用.我们通过RT-PCR、蛋白印迹和免疫荧光等技术各种NCBT以及其他重要的HCO3–转运体在雌性生殖道组中的表达与分布，并初步研究了NBCn1在雌性生殖道组织中的表达与雌性生殖周期的关系。.（3）NCBT的结构与功能研究。.我们对克隆的各种不同NBCn1剪接体的活性进行了分析，发现了NBCn1的两个重要的增强转运体活性的结构域。此外，通过与NBCe1的结构和活性的比较分析，我们对决定NBCe1的生电性相关的结构功能元件进行了探索。.通过本课题的工作，我们共发表SCI论文5篇，国内核心期刊论文1篇，会议论文6篇，此外还有一篇Journal of Physiology论文在审稿中。