NBS1基因突变及表达异常在原发性肝癌发生发展中的意义

NBS1 is an important double-stranded DNA repair gene, mutation of NBS1 gene can lead to leukemia, lymphoma and other tumors. Our previous study found NBS1 mutation and higher Nbs1 expression were observed in tumor compared to corresponding adjacent non-tumor tissue in patients with primary liver cancer.This study intends to further study function of NBS1 mutation of V348D and S633T in liver cancer cell line and nude mice. We will also detect TP53 genetic pathways to explore the mechanism of NBS1 mutations in the development of primary liver cancer. In addition, this study intends to research relationship of Nbs1 protein and tumor differentiation degree, metastasis and recurrence in clinical specimens of primary liver cancer The study is of great significance in revealling the molecular mechanismt, finding the new tumor markers and developing targeted drugs of primary liver cancer.

NBS1是一种重要的双链DNA断裂修复基因，NBS1基因突变参与多种肿瘤的发生。我们前期研究发现NBS1基因在原发性肝癌患者肿瘤组织中的突变率增高，癌组织较癌旁组织表达增多。但该基因突变引起肝癌发生的机制尚不清楚。本研究拟选择前期实验中检测到的两个NBS1基因功能结构域区的错义突变V348D和S633T，通过构建突变载体和细胞转染技术，在肝癌细胞系中进一步研究NBS1突变对肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移等影响，并在裸鼠肝癌模型上加以证实。同时检测TP53通路的分子遗传学改变，进一步探究NBS1基因突变参与原发性肝癌发生发展的机制。此外,本研究拟在临床原发性肝癌标本中研究Nbs1蛋白与肿瘤恶性分化程度、转移及复发等恶性生物学特征的关系，进一步揭示Nbs1蛋白与临床肝癌预后的关系。该研究对进一步揭示原发性肝癌发生发展的分子机制、发现新的肿瘤标志物以及今后研制靶向药物具有重要意义。

背景：NBS1是一种DNA损伤修复基因，既往研究提示NBS1突变与肝癌的发生密切相关，但机制尚不明确。研究内容和重要结果：我们利用两个NBS1基因功能结构域区的错义突变V348D和S633T，通过构建突变载体和细胞转染技术，在肝癌细胞系中进一步探讨NBS1突变与肝癌的关系。体外和体内实验结果均提示NBS1突变可以抑制肝癌细胞的生长和增殖。这种作用可能与TP53基因突变有关。RT-PCR和western blot 实验显示与癌旁组织相比，肝癌组织中Nbs1蛋白表达增高，并与肿瘤的临床分期和分化程度差有关。进一步的临床预后Cox回归分析显示谷草转氨酶、肿瘤低级别分化和Nbs1高表达与患者术后复发有关。科学意义：NBS1基因和肝癌的发生发展密切相关，肝组织中Nbs1蛋白水平与肿瘤的分化和患者预后密切相关，Nbs1蛋白可能成为肝癌诊断和治疗的新的标志物。