从中性粒细胞自释DNA经TLR9激活自身免疫探讨解毒祛瘀滋肾法对系统性红斑狼疮的作用机理

Systemic lupus erythematosus (SLE) is a kind of autoimmune diseases involving multiple organs damage.It is mainly treated with glucocorticoids,while as it is well known that long-term use of glucocorticoids is accompanied with many side-effects. The theraputic method,Jieduquyuzishen can successfully control SLE and relieve patients'dependence on glucocorticoid.Our previous research indicated that Jieduquyuzishen recipe regulating natural immune system is different from that of glucocorticoids. Jieduquyuzishen recipe inhibits peripheral white blood cell apoptosis and enhances the phagocytosis,while glucocorticoid induces lymphocyte apoptosis and inhibites macrophage phagocytosis. .Activation of the immune system by apoptosis of neutrophil can cause the deterioration of SLE.We hypothesize that Jieduquyuzishen method inhibits neutrophil apoptosis and enhances macrophage phagocytosis through modulation of TLR9 signaling pathway. In this study,we compare the difference of MRL/lpr lupus mice and TLR9 knockout mice that treated with Jieduquyuzishen recipe and also for cytology test.Then we study the mechanism of Jieduquyuzishen method on regulation of TLR9 signaling pathway in granulocyte-monocytes of SLE.

系统性红斑狼疮(SLE)是一种累及多系统多脏器损害的自身免疫性疾病，糖皮质激素是目前临床治疗系统性红斑狼疮的主要方式，长期使用会产生很多副作用。解毒祛瘀滋肾法能显著降低SLE病情活动和减少激素用量。前期研究数据显示解毒祛瘀滋肾法对固有免疫系统的调节与糖皮质激素的作用机制并不完全相同。解毒祛瘀滋肾方可以抑制单核细胞的凋亡并增强其吞噬作用，糖皮质激素则显著诱导外周血细胞凋亡并抑制巨噬细胞的吞噬能力。.中性粒细胞过度凋亡自释DNA激活自身免疫是启动SLE发病的重要原因。我们推测解毒祛瘀滋肾法通过调节TLR9的信号通路抑制了中性粒细胞的凋亡，并增强了单核巨噬细胞的吞噬能力，从而达到增效减毒作用。在本课题中我们将MRL/lpr狼疮鼠和TLR9基因敲除小鼠进行平行比较，并进行相应的细胞学实验，探讨解毒祛瘀滋肾方对系统性红斑狼疮粒-单核细胞的TLR9信号通路调节。

系统性红斑狼疮(SLE)是一种累及多系统多脏器损害的自身免疫性疾病，糖皮质激素是目前临床治疗系统性红斑狼疮的主要方式，长期使用会产生很多副作用。解毒祛瘀滋肾法能显著降低SLE 病情活动和减少激素用量。我们推测解毒祛瘀滋肾法通过调节TLR9 的信号通路抑制了中性粒细胞的凋亡，并增强了单核巨噬细胞的吞噬能力，从而达到增效减毒作用。在本课题中我们将探讨解毒祛瘀滋肾方对系统性红斑狼疮粒-单核细胞的TLR9 信号通路调节。 .本课题的实验结果表明ODN刺激RAW264.7小鼠单核巨噬细胞后引起TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-α的高表达，而运用解毒祛瘀滋肾方含药血清进行干预后，可以抑制TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-α的高表达。体外分离大鼠外周血淋巴细胞，单核细胞，中性粒细胞进行体外干预检测。结果表明解毒祛瘀滋肾方和糖皮质激素均能抑制BAFF, BAFF-R, Bcl-2, IL-10 and NF-κB的表达。细胞增殖实验和流式检测发现BAFF激活的外周血淋巴细胞的活性可以被糖皮质激素和解毒祛瘀滋肾方抑制。但与糖皮质激素不同的是，解毒祛瘀滋肾方不会增强外周血淋巴细胞的凋亡。在明确解毒祛瘀滋阴药能够防治狼疮鼠类固醇性骨质疏松症的基础上，探讨其君药生地黄对狼疮鼠类固醇性骨质疏松症的疗效及可能的作用机制。实验说明解毒祛瘀滋阴药中君药生地黄对狼疮鼠类固醇性骨质疏松的疗效确切，其作用机制可能与其增加骨髓BMP-7的含量有关。.通过以上的实验工作表明解毒祛瘀滋肾方具有明确的抗炎作用，我们的研究发现该方药对炎症激活的TLR9通路和BAFF通路的抑制作用明确，这两条通路下游均激活NF-kB，这为我们后期富集解毒祛瘀滋肾方中的有效抗炎成分奠定了基础。课题发表中文核心期刊三篇，SCI文章两篇，申请发明专利2项。