治疗SLE复方中的抗炎物质分离及对狼疮活动干预机制的研究

The survival rate of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) has been greatly improved in the past decades, but most of the disease is not well controlled, and it is easy to relapse in the process of drug withdrawal. One year of effective disease control is less than 20%. Traditional Chinese medicine treatment of SLE can effectively reduce the patient's disease onset and reduce the use of glucocorticoid. Jieduquyuziyin prescription (JP) and Shengmabiejia decoction (SD) are widely used for SLE treatment and shown anti-inflammatory effect. How to further enhance the anti-inflammatory effect and reduce SLE patient dependence on glucocorticoid is a very important thing to improve the efficacy of traditional Chinese medicine. In this study, we prepared the affinity chromatography column of glucocorticoid receptor (GR) and nuclear factor kappa B (NF-kB) protein, and separated the components which can bind with GR and NF-kB from JP and SD by affinity chromatography. By detecting the isolated components on the regulation of GR/ NF-kB signaling pathways and the inflammatory responses of MRL/lpr mice, we hope to screen anti-inflammatory substances and establish a new method for the treatment of SLE with Traditional Chinese Medicine. This research will lay the foundation for modern Traditional Chinese Medicine prescriptions with clear components and definite therapeutic targets.

系统性红斑狼疮患者的生存率在过去几十年有了极大提高，但大多数人的病情容易反复，有较好的一年疾病控制期的病人不到20%。中药治疗SLE可以有效的降低疾病发作率，减少糖皮质激素的使用量，解毒祛瘀滋肾方和升麻鳖甲汤是治疗SLE的有效复方并具有明确的抗炎效应，但同样存在疗效不突出的共性问题。进一步增强该类复方的抗炎作用，减少患者对糖皮质激素的依赖对于提高复方的临床疗效具有重要意义。在本课题中，我们制备糖皮质激素受体（GR）和核因子-κB (NF-kB)蛋白的亲和层析柱，利用亲和层析的方法靶向分离中药复方中的抗炎复合物。通过检测复合物对细胞中GR和NF-kB蛋白的调控以及对狼疮鼠炎症抑制作用，评判此类抗炎复合物对狼疮活动的干预机制。课题研究期望获得药物质量可控并且作用靶点明确的现代中药复方，从而为SLE的中药新治法提供思路。

系统性红斑狼疮（SLE）是一种复杂的系统性自身免疫疾病，因抗核抗体复合物在各种器官的沉积从而涉及多系统性损害。中医将系统性红斑狼疮分为6种证型，其中热毒炽盛型SLE患者表现出典型的免疫系统亢奋，且多发生在狼疮活动期，严重时可致狼疮危象。我们研究发现细胞因子分泌紊乱（IL-6、IFN-α、TNF-α、MCP）、T细胞亚群失衡、抗体分泌增加、氧化应激反应增强等与热毒炽盛症候密切相关。.初期我们对治疗SLE的多种复方进行疗效评价，证实解毒祛瘀滋肾方有效。拆方研究发现白花蛇舌草在降低血清细胞因子分泌（IL-6,IFN-α,TFN-α），以及减少血清抗核抗体生成，降低尿蛋白含量，最后改善狼疮模型小鼠肾脏病理损害等方面均表现出了优势。我们对白花蛇舌草干预后发生改变的血清代谢物进行GC-MS检测并汇总做了IPA分析，发现白花蛇舌草与IL-6信号通路被抑制密切相关。然后对白花蛇舌草的成分进一步分离提取，并筛选其活性部位，发现乙酸乙酯提取部位和多糖部位可能是其治疗SLE的活性成分。我们对复方中分离得到的单体化合物也做了治疗SLE的药效评价工作，发现芦丁、隐丹参酮、染料木素、白藜芦醇等表现出成药性。.虽然临床使用的多种治疗SLE的复方中添加白花蛇舌草，但是关于其治疗SLE的机制仍然停留在清热解毒这个理论阶段。通过本课题的研究中我们发现白花蛇舌草可以调控IL-6/STAT3通路抑制抗核抗体生成，并改善肾损害损害。我们也在课题中进一步筛选了白花蛇舌草的潜在活性部位和具有成药性的单体。以上工作为白花蛇舌草在治疗SLE中的开发应用奠定基础。