接头蛋白SLAT在类风湿关节炎Th17细胞分化中的作用及机制

类风湿关节炎（RA）是一种常见的慢性炎症性疾病，辅助性CD4+T细胞（Th）的异常活化是RA发病的中心环节。Th17细胞是新近发现的一种能特异性产生IL-17 的Th细胞亚群，其分化调控异常介导的过度炎症反应在RA发病中起关键作用。本项目从探讨调节Th17细胞分化的分子机制出发，以研究接头蛋白SLAT对RA患者Th17细胞分化的作用及机制为目标，在体外培养CD4+T细胞，构建SLAT基因过表达和RNA干扰系统，通过观察 ⑴ SLAT对RA患者Th17细胞分化的影响；⑵ 修饰SLAT对RA 患者Th17细胞分化的影响和机制；⑶ SLAT影响RA患者Th17细胞分化的信号通路，从而阐明SLAT在RA 患者Th17细胞分化中的作用和机制，为发现调控Th17细胞分化的分子靶点及其对RA潜在的治疗作用提供理论和实验的依据。

本项目从探讨类风湿关节炎（RA）患者Th17细胞分化的分子机制出发，以研究接头蛋白SLAT对RA患者Th17细胞分化的作用及机制为目标，在体外培养CD4+T细胞和PBMC，构建CD30 aptamer-SLAT-shRNA 嵌合体，干扰SLAT，观察到：.① 活动期RA患者关节液中Th17细胞较外周血明显增多，且关节液Th17细胞比例与全身炎症指标相关；.② 活动期RA患者外周血Treg细胞变化不明显，但ACPA阴性组较阳性组增多，关节液中Treg细胞较外周血明显增多；.③ 采用免疫荧光、流式细胞术、实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）发现SLAT表达于CD4+T细胞的胞膜和胞质，其蛋白水平在活动期RA患者外周血和关节液中增加，基因水平差别不明显，但也呈增多趋势，与Th17细胞变化趋势相似；.④ CD30 aptamer-SLAT-shRNA嵌合体能转染活化T细胞，有效沉默SLAT；.⑤ 体外给予anti-CD3/anti-CD28和Th17细胞分化细胞因子刺激PBMC，CD4+T细胞SLAT表达增多；.⑥ CD30 aptamer-SLAT-shRNA 嵌合体能抑制CD4+T细胞向Th17细胞分化，减少细胞因子IL-17和TNF-α的分泌，降低CD4+RORγt+T细胞、CD4+IL-17+T细胞、CD4+TNF-α+T细胞比率。. 结果提示，SLAT在RA关节炎症中发挥一定作用，参与了RA患者Th17细胞分化，其机制是通过调控关键转录因子RORγt调节Th17细胞分化，为下一步动物实验或临床应用提供了理论和实验依据。