IL-35对Th17细胞的调控机制及其在自身免疫性肝炎中的作用

Autoimmune hepatitis(AIH) is an immune-mediated liver disorder. In our previous studies, we have found that the frequencies of Th17 cells in peripheral blood and liver of AIH patients are significantly increased. Furthermore, we demonstrated IL-17 increases the production of IL-6 by hepatocytes, which, in turn,further stimulates Th17 cells and provides a positive feedback loop between Th17 cells and hepatocytes exacerbating the inflammatory process. Recently, IL-35 was identified, which belongs to the IL-12 cytokine family member. Accumulating evidence shows that IL-35 can block the development of Th17 cells. Therefore, we make a hypothesis that IL-35 can reduce the severity of AIH by suppressing the Th17 cells differentiation and the production of IL-17. In this research, we aim to study the regulatory of IL-35 to Th17 cells and its effect on AIH. We will focus on the following important scientific problems: Firstly, to detect the level of IL-35 and analyze the correlation between IL-35 and IL-17, clinical features of patients with AIH; Secondly, to investigate the effect of IL-35 on the differentiation of human Th17 cells; Finally, to study the role of IL-35 in AIH animal model and find the possible mechanism of the interatcion between IL-35 and Th17 cells in order to explore the clinical implication in AIH.

自身免疫性肝炎（AIH）是由异常自身免疫反应介导的肝实质炎症性病变。我们前期的研究发现AIH中外周血和肝内Th17细胞数量及IL-17的表达显著高于正常人，并可通过IL-17与IL-6之间形成正反馈机制加重肝内炎症。IL-35是新近发现的细胞因子，属IL-12家族成员，可通过抑制Th17细胞分化发挥免疫调节作用。因此，IL-35能否通过负调控Th17细胞在AIH发病中起着保护作用成为值得探究的问题。本研究着重研究IL-35在AIH中的表达及对Th17细胞调控机制，以及IL-35对AIH动物模型的保护作用。拟回答以下科学问题：①AIH中IL-35的表达水平及其与肝细胞损伤、IL-17的相关性；②在细胞水平研究IL-35对人体Th17细胞分化、发育的调控机制；③IL-35通过调节Th17细胞缓解AIH动物模型肝细胞损伤及肝内炎症，为AIH的治疗提供潜在的靶点。

自身免疫性肝炎（AIH）是由异常自身免疫反应介导的肝实质炎症性病变。IL-35是IL-12家族新成员，是由P35和EBI3亚基组成的异源二聚体，可发挥免疫抑制作用，从而减轻炎症和自身免疫反应。我们通过研究发现IL-35的两个亚单位EBI3和P35在肝组织中表达均升高，且P35的表达升高与肝内炎症程度和纤维化程度均呈正相关。我们课题组前期研究发现一群具有免疫调节功能的细胞-髓系源性抑制细胞（MDSCs）与肝脏的炎症和纤维化进展密切相关，在AIH中发挥免疫抑制作用，从而在疾病的进展中起到“保护性”的作用。通过分离AIH患者外周血单个核细胞，进行流式细胞术分析，我们发现MDSCs在AIH患者外周血比例显著升高。我们进一步流式细胞分析发现AIH及PBC患者的MDSCs的细胞表面都表达EBI3的受体gp130，以及p35的受体IL12Rβ2。应用免疫荧光共聚焦显微镜扫描肝组织时，我们发现MDSCs的细胞标志物CD33与gp130，IL12Rβ2具有较好confocal共定位，进一步证实MDSCs细胞是IL35作用的靶细胞。在体外细胞培养实验中，我们发现IL-35能显著促进MDSCs扩增。综上所述，IL-35通过MDSCs在 AIH中发挥重要作用，为AIH临床诊治提供新的思路。另外通过IL-17对人肝星状细胞影响的研究，发现IL-17可促进人肝星状细胞活化和胶原纤维的表达，从而促进肝纤维化的发生、发展，可为纤维化的免疫治疗提供新的靶点。