健脾祛痰方调控miRNA27-PPARγ轴影响AS大鼠血管周围脂肪细胞分化的机制研究

Perivascular adipose tissue has attracted the attention of scholars due to its special anatomical position. The previous study of the research group found that the AS model has increased perivascular fat deposition, and a large number of studies have confirmed that various cytokines secreted by perivascular adipocytes can promote arterial plaque formation through paracrine effects. Based on the theory of "spleen qi distribute essence", this study proposes a hypothesis: 'Jian Pi Qu Tan' prescription can affect the differentiation of perivascular adipocytes through the miR27-PPAR γ axis and reduce atherosclerosis.This project intends to establish the model of atherosclerosis in rats, and explain the mechanism of "spleen qi can not distribute essence" leads to the formation of AS.We will investigate the effects of 'Jian Pi Qu Tan' prescription on the fat deposition and miRNA27-PPARγ-axis mediated differentiation of perivascular adipocytes through the in vitro and in vivo experiment.We will elucidate the mechanism of 'Jian Pi Qu Tan 'prescription treating atherosclerosis，to provide a scientific basis for TCM to treat atherosclerotic diseases from the spleen and enrich the theory of spleen.

动脉粥样硬化疾病在我国发病率逐年上升。以《内经》“脾气散精”理论为指导，以中医药“治未病”理念为启示，可将AS研究重心前移。课题组前期研究发现健脾祛痰法可减少AS模型主动脉管腔粥样斑块面积，减少肝脏脂肪沉积，影响脂肪细胞分化，调节PPAR蛋白表达，但机制不明。血管周围脂肪因其与血管的特殊解剖位置引起学者们的关注，课题组前期研究发现AS模型血管周围脂肪沉积加重，有大量研究证实血管周围脂肪细胞分泌的各种细胞因子可通过旁分泌效应促进动脉斑块形成。基于“脾气散精”理论，本研究提出假说：健脾祛痰方可通过miR27-PPARγ轴影响血管周围脂肪细胞分化，减轻动脉粥样硬化。本项目通过构建AS模型大鼠，阐述脾不散精导致AS形成的机制，探讨健脾祛痰方对miR27-PPARγ轴介导的血管周围脂肪细胞分化及脂肪沉积的影响，阐明健脾祛痰方治疗AS的效应机制，为中医“从脾论治”AS提供科学依据，丰富脾脏象理论。

动脉粥样硬化疾病在我国发病率逐年上升。以《内经》“脾气散精”理论为指导，以中医药“治未病”理念为启示，可将AS研究重心前移。课题组前期研究发现健脾祛痰法可减少AS模型主动脉管腔粥样斑块面积，减少肝脏脂肪沉积，影响脂肪细胞分化，调节PPAR蛋白表达，但机制不明。血管周围脂肪因其与血管的特殊解剖位置引起学者们的关注，课题组前期研究发现AS模型血管周围脂肪沉积加重，有大量研究证实血管周围脂肪细胞分泌的各种细胞因子可通过旁分泌效应促进动脉斑块形成。基于“脾气散精”理论，本研究提出假说：健脾祛痰方可通过miR27-PPARγ轴影响血管周围脂肪细胞分化，减轻动脉粥样硬化。本项目通过构建动脉粥样硬化模型大鼠，分别借助体内实验及体外实验，探讨健脾祛痰方调控血管周围脂肪细胞防治动脉粥样硬化早期病理变化的作用机制，从血管周围脂肪细胞分化角度阐明《内经》“脾气散精”的科学内涵。.本项目研究认为，膏脂的转运皆有赖于脾的健运，受“脾气散精”环节的调控；“脾不散精”，加重脂肪沉积，促进动脉粥样硬化的发生发展；“脾不散精”，膏脂转运障碍，痰浊内生是AS形成的关键病机。健脾祛痰方可降低AS模型大鼠炎症因子IL-6和TNF-α水平，降低AS模型大鼠血脂TC、TG、LDL水平，且药物的效应随着药物浓度的增加而增强；可以保护大鼠血管结构，促进AS模型大鼠显微结构恢复正常，且中药组随着剂量的增加，显微结构越类似于正常组，随着剂量的减少，显微结构越类似于模型组；可以影响大鼠脂肪细胞内脂滴情况并升高大鼠脂肪细胞中UCP1的mRNA表达水平，促进PVAT细胞分化；可以升高大鼠脂肪细胞中miRNA-27a、miRNA-27b的mRNA表达水平，降低PPARγ、C/EBPα的mRNA表达水平；可以降低大鼠脂肪细胞中PPARγ蛋白表达水平。应用健脾祛痰方治疗动脉粥样硬化性疾病是以“益气健脾”治其本，“祛痰化浊”治其标，通过miRNA27-PPARγ轴调控血管周围脂肪细胞分化，影响动脉粥样硬化的发生和发展。本项目为中医“从脾论治”动脉粥样硬化性疾病提供科学依据，丰富脾脏象理论，促进中医学术水平进步。