新型纳米化的非核苷类乙型肝炎病毒抑制剂的体内外研究

At present, anti-hepatitis B virus (HBV) drugs are mainly nucleos(t)ide analogues(NAs). However, the rates of drug resistance and side effects are gradually growing with the extensive application of the NAs. GLS4, a member of heteroaryldihydropyrimidines (HAP) compound, is a non-nucleosidic novel inhibitor developed in China. To improve the solubility and bioavailability of GLS4 are critical for the enhancement of the anti-HBV effect. Lipid–polymer hybrid nanoparticles (LPNs) are becoming a new generation of powerful drug-delivery system owing its excellent biocompatibility, bioavailability and sustained release feature. In our previous study, we developed LPNs with size of 150nm by one-step ultrasonic emulsification method. The encapsulation efficiency of LPNs for GLS4 is above 70% with no cytotoxicity, and with passive liver targeting property. In this proposed study, the encapsulated GLS4 (or GLS4 loaded-LPNs) will be tested for its anti-HBV effect and biosafety in vitro and in vivo. The mechanisms of its anti-HBV effect will also be studied. Successful implementation of this project may provide a new strategy in the improvement of anti-HBV therapy.

目前抗乙型肝炎病毒（HBV）的药物主要为核苷(酸)类似物，但伴随其广泛的应用导致耐药性和毒副作用等问题逐渐凸显。异芳基二氢嘧啶（HAP）类化合物GLS4是我国自主研发的非核苷(酸)类新型化合物，具有与核苷(酸)类似物完全不同的作用机制。如何进一步改善GLS4的水溶性、提高生物利用度以实现更强的抗HBV活性，是目前需要解决的问题。一种脂质-聚合物结合型纳米粒（Lipid–polymer hybrid nanoparticles，LPNs）因其极好的生物兼容性、生物利用度及药物可缓控性而成为新一代功能强大的药物投递系统。在前期工作中，我们采用一次性超声乳化法制备了粒径约150nm的LPNs，该纳米粒对GLS4的包封率达到70%以上，无细胞毒性和具有被动肝脏靶向性。本课题拟进一步研究纳米化的GLS4在体内外的抗病毒活性及安全性，并对其作用机制进行初步探讨，为提升抗乙肝病毒药物的疗效提供新途径。

纳米科技的高速发展，为医药领域提供了高新技术手段和方法。其中纳米药物是近年得到飞速发展的一个分支领域，产生了很多功能独特的纳米药物。与传统药物相比，纳米药物在提高生物利用度、增强靶向性、增强缓控释性、建立新的给药途径等方面显露出奇特的优势。.本项目的主要研究内容是制备包载非核苷（酸）类 HBV抑制剂GLS4的脂质-聚合物结合型纳米粒（LPNs-GLS4），研究LPNs-GLS4在体内外的抗病毒活性、安全性及相关作用机制。在本研究过程中，我们采用一次性超声乳化法制备了粒径约150nm的LPNs，电镜下可见明显的核-衣壳双层结构，该纳米粒对GLS4的包封率达到70%以上，无细胞毒性和具有被动肝脏靶向性。体外抗病毒活性显示，纳米化的GLS4与游离的GLS4相比，其抗病毒活性有明显提升。GLS4是我国自主研发的非核苷(酸)类新型化合物，与目前抗HBV的一线药物核苷类似物有不同的作用机制，可以改善目前核苷类似物的耐药性等问题，且目前已经完成了II期临床试验，具有很好的临床应用前景。但GLS4水溶性较差，且半衰期短，需要反复给药。借助纳米材料，是解决这些问题的良好途径，为临床提升抗乙肝病毒药物的疗效提供新思路。