动物视网膜神经元和RPE细胞对不同波长可见光刺激耐受性的研究：对光耐受不良导致眼病防御机制的探讨

可见光刺激是维持眼球正常发育与功能实现的关键因素。但同时也为某些疾病的发生、进展提供了条件。尤其是过量光刺激，还可能是某些视网膜疾病发生的原动力。.视网膜色素变性（RP）、老年性黄斑变性（AMD）等疾患最被普遍接受的病因是"超量光"对视网膜色素上皮及视网膜神经神经元的破坏。但同时，众所周知，可见光的刺激又是维持视网膜正常发育的必要条件。故防止"超量光"刺激成为视网膜保护的关键。可见光对视网膜的损伤作用在以往的研究中已被充分证实，但视网膜光化学损伤的机制尚无定论，并且，光损伤的域值与波谱范围也并不清楚。我们前期的工作主要分别聚焦于拆分可见光，观察不同窄谱可见光光损伤及视网膜神经元保护。本课题拟利用基因缺陷和光损伤动物模型、全基因组表达谱芯片技术，从组织、细胞和分子水平探讨不同波长和强度可见光作用下感光细胞、RPE细胞和视网膜微环境的改变；确定视网膜对可见光波长和强度的耐受域值。

可见光刺激是维持眼球正常发育与功能实现的关键因素，也是眼部组织细胞重要的损伤因素。本项目利用窄波长光刺激细胞培养箱(专利号：201220431935.1)完成光损伤模型，成功绘制光损伤细胞域值基线，确定不同种类的视网膜细胞对不同波长、强度可见光具有不同的敏感性。确定视网膜神经节细胞和视网膜色素上皮细胞的主要损伤光波长为429.4-483.4nm的蓝光。利用血清剥夺实验证实，营养成分有利于视网膜神经节细胞的光损伤保护。确定不同细胞发育阶段，视网膜神经节细胞的可见光耐受域，最大和最小损伤光波长、时间和强度。证实超量短波长蓝光暴露可显著的、时间依赖性的减低视网膜神经节细胞活性，诱导视网膜神经节细胞死亡，主要形式为细胞凋亡，并且线粒体相关凋亡通路参与其中。超量蓝光暴露下，RGC-5细胞ROS生成增加，活性氧敏感蛋白Nrf2和HO-1表达的显著增加，氧化应激状态升高。利用全基因组表达谱芯片，高通量、系统检测窄谱蓝光暴露对视网膜神经节细胞RGC-5全基因组基因表达的影响。并进一步证实，蓝光可以诱导视网膜神经节细胞RGC-5内的p38和JNK通路的持续激活，并在早期激活ERK途径，c-jun和c-fos蛋白同时作为MAPK通路激活的靶蛋白，刺激下游通路。