基于胃肠转运和生理药动学模型探索中药复方组分配伍相互作用规律及机制

本项目在已有工作的基础上，以三物黄芩汤为研究示范，以组分配伍为切入点，采用生物药剂学和现代色谱技术等综合分析手段，围绕胃肠吸收介导的药物相互作用，在细胞-器官-整体动物多层次模型基础上，将胃肠道内的生物转化和生理药动学（PBPK）模型纳入吸收机理研究体系，并进行多吸收靶点预测、种间类推、多成分生理药动学模型整合及其模型间关联分析，从而构建"胃肠吸收-菌群代谢-生理药动学"三维模型系统优化中药胃肠吸收动力学的方法学研究体系，更好的从组分-组分、组分-靶点两方面探索"究竟是哪类成分作用于吸收环节的哪个靶点？如何作用？作用结果又如何表征？"等复方配伍研究中亟待解决的问题。本项目的实施为中药复方多成分吸收机理及其相互作用机制研究提供方法学借鉴的同时，将对揭示中药配伍用药奥秘，丰富中医学术内涵和创制现代中药研究起到积极的推动作用。

本研究对三物黄芩汤组分（群）配伍的胃肠动力学进行了较为系统和全面的研究。首先采用多维色谱切割技术，富集了黄芩黄酮类、苦参生物碱类和地黄多糖类有效部位，所采用的技术绿色环保、适合于大规模工业生产；为保证后续研究的可重现性，分别建立了3类组分（群）总药效成分含量测定的比色法、5个黄酮类和3个生物碱类指标性成分的HPLC法；为保证后续研究结果的准确性，系统研究了黄芩素及黄芩提取物中5种黄酮类成分的体内、外稳定性，并探讨了黄芩素和黄芩苷单体给药与提取物给药后的稳定性差异；建立了Caco-2细胞模型并对模型的完整性进行了系统评价，研究了三物黄芩汤组分（群）配伍（12个配伍组方）在Caco-2细胞单层模型中的配伍机制和相互作用规律；建立了大鼠在体肠单向灌流模型，研究了三物黄芩汤组分（群）配伍（12个配伍组方）在大鼠在体肠模型中的相互作用规律。为进行生理药动学模型拟合，收集了生理参数和化合物特征参数，包括测定了3个黄酮类和1个生物碱类成分单体及其提取物给药的lgD、测定了3个黄酮类和1个生物碱类成分的PKa、总黄酮和总生物碱给药后7个指标性成分的血浆蛋白结合率、累计肾排泄率、体外代谢率及进行了组织分布和体内药动学研究。获取药动学模型参数的同时，统计了上述各项研究中组分（群）配伍的相互作用规律。