系统性红斑狼疮中microRNA-7的表达及功能研究

Abnormal B cell proliferation and activation is one of the characteristics of systemic lupus erythematosus (SLE). PTEN is a negative regulator of the PI3K/Akt signaling pathway,and PTEN inactivation will affect the clearance of autoimmune B cells and the formation of central tolerance. The present study shows that mir-7 involve in cell apoptosis and cell cycle regulation.However, its role in the pathogenesis of SLE is poorly studied. Our previous study found increased mir-7 and decreased PTEN in the B cells of SLE patients. We also verified that PTEN is a target gene of mir-7. Overexpression or inhibition of mir-7 in B cells could promote or suppress B cell proliferation correspondly.Here we speculated that mir-7 may affect B cell proliferation via PTEN. In the current study, we will further observe that mir-7 is involved in B cell proliferation,differeniation and cytokie secretion via PTEN/PI3K/Akt pathway.The present work will introduce us new insights into the pathogenesis of SLE and find an potential therapeutic method.

B细胞异常增殖活化是系统性红斑狼疮（SLE）的特征之一。PTEN是PI3K/Akt信号通路的负调因子，PTEN失活会影响自身免疫性B细胞的清除和中枢耐受的形成。目前研究表明miR-7参与细胞凋亡和周期的调控，然而其在SLE的发病中的作用尚无报道。我们前期研究发现SLE 患者B细胞中miR-7水平增高而PTEN表达下调，并验证了PTEN是miR-7的靶基因之一，在B细胞中过表达或抑制表达miR-7，B细胞增殖功能相应增强或者减弱，可以推测miR-7可能通过调控PTEN基因的表达来影响B细胞的增殖功能。在前期实验的基础上，本课题将进一步研究miR-7通过PTEN/PI3K/Akt通路参与SLE患者B细胞的增殖、分化及细胞因子分泌等。研究结果将为SLE的治疗提供新的理论依据及靶点。

系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一种多系统受累的自身免疫性疾病，B细胞的异常增殖活化是SLE的特征之一。小RNA（microRNAs，miRNAs）是近年来发现的一类单链非编码小RNA，成熟miRNA能够在转录后水平抑制靶mRNA表达，miRNAs在进化中高度保守。近年多项研究证明，miRNAs参与生物体的生长、发育、衰老、凋亡的调控及遗传背景的稳定，并与人类疾病相关。项目负责人前期工作中初步发现SLE的发病与mir-7的异常表达相关。本研究就mir-7在SLE患者中的表达及功能进行了探讨，进一步发现，（1）SLE患者B细胞中mir-7的表达显著高于HC,具有统计学差异;（2）SLE患者B细胞中PTEN的mRNA水平及蛋白水平的表达均较HC下调；（3）尚未发现miR-7与SLE的疾病活动度如SLEDAI评分、抗ds-DNA水平、C3水平、尿蛋白等具有相关性；（4）生物信息学预测PTEN 3‘UTR上存在有mir-7的结合位点；（5）双荧光素酶报告基因系统验证PTEN为mir-7的靶基因之一；（6）通过电转染的方法，能够成功转染人外周血B细胞；（7）直接在B细胞中过表达或者抑制表达mir-7后，检测PTEN的表达，在HC的B细胞中，过表达mir-7后能够下调PTEN的表达，在SLE的B细胞中，抑制表达mir-7后，能够上调PTEN RNA及蛋白的表达。（8）在SLE患者及健康对照B细胞中均发现，过表达miR-7能够促进B细胞增殖，抑制miR-7的表达能够抑制B细胞增殖，但对B细胞凋亡没有明显影响。（9） 在SLE患者及健康对照B细胞中过表达或抑制表达miR-7，对B细胞的凋亡及磷酸化均没有明显影响.. miR-7在人体内的生物学功能的认识还十分有限，在SLE中的作用尚无报道，本研究在这一领域的探索有助于了解SLE复杂的发病机制，为建立治疗新策略提供有价值的信息。