B淋巴细胞刺激因子与其受体介导实验性关节炎的病理机制及TACI-Ig的治疗作用

T、B细胞是参与类风湿关节炎（RA）的重要免疫细胞，B细胞对抗原应答及产生抗体需要T细胞与B细胞的相互作用，B淋巴细胞刺激因子(BLyS)可通过其受体调节B细胞存活、增殖、抗原呈递等，是调节T细胞与B细胞间相互作用的重要因子，TACI-Ig是BLyS受体的阻滞剂。BlyS如何通过其受体调节T、B细胞间相互作用参与RA病理过程目前未见报道。为阐明BlyS调节T、B细胞间相互作用参与RA的病理机制，本项目拟采用小鼠胶原性关节炎（CIA）模型，利用免疫荧光、流式细胞术、免疫沉淀、基因沉默等技术，探讨T、B细胞表面分子以及BlyS 和其受体TACI的表达；共培养T、B细胞，以BlyS、TACI-Ig等分别作用，测定特征性细胞因子的水平，分析Blys及其受体介导的信号在CIA 小鼠异常免疫反应中的作用，同时观察TACI-Ig对小鼠CIA的治疗作用和机制；为发现治疗RA新的作用靶点和治疗药物提供依据。

近年来，随着B淋巴细胞靶向清除药物利妥昔单抗（rituximab）对RA治疗所取得的成功，B细胞在类风湿关节炎（RA）等自身免疫病病理机制中的作用引起了人们进一步的认识。B淋巴细胞刺激因子（BlyS），属于肿瘤坏死因子超家族成员，通过与相应受体跨膜活化子和CAML作用子（TACI）、B细胞成熟抗原（BCMA）和B细胞活化因子受体（BAFF-R）结合，调节B细胞池的大小和功能，促进B细胞不同发育阶段免疫球蛋白（Ig）类别转换和重组，是B细胞发育、存活和活化的重要调节因子。研究发现，活化的T细胞也产生BlyS，表达BAFF-R和TACI两种受体，BlyS参与辅助性T淋巴细胞（Th）的分化和活化。TACI-Ig是由TACI分子细胞外部分与人IgG的Fc段通过生物工程技术构建的融合蛋白，作为一种诱骗受体，能够竞争性结合BlyS，阻止BlyS与相应的受体结合，阻断下游信号转导，产生生物学效应。为了进一步探讨BlyS在T、B淋巴细胞介导的炎症免疫反应中的作用和机制，本研究在成功建立实验性关节炎动物模型的基础上，通过体内外结合，系统研究了BlyS及其受体在实验性关节炎病理机制中的作用，同时观察TACI-Ig对实验性关节炎的治疗作用，以进一步明确BlyS的作用和机制。结果表明：（1）BlyS在T、B淋巴细胞介导的炎症免疫性动物模型中异常升高，与关节病理学表现密切相关。（2）TACI-Ig对佐剂性关节炎（AA）大鼠和胶原性关节炎（CIA）小鼠具有明显的治疗作用，降低关节炎指数，改善关节和脾脏病理学变化。（3）TACI-Ig调节抗炎细胞因子和促炎细胞因子的平衡，降低免疫球蛋白水平。（4）TACI-Ig降低AA大鼠滑膜和肠系膜淋巴结中TACI、BCMA蛋白表达，升高BAFF-R蛋白表达。（5）TACI-Ig体外用药抑制KLH小鼠T细胞异常增殖活化功能、调节细胞因子和抗体产生，调节T、B淋巴细胞亚群。（6）BlyS通过IKK-NF-κB通路促进小鼠B淋巴细胞的异常增殖和分化，TACI-Ig通过对IKK-NF-κB通路的调节发挥对B淋巴细胞抑制作用。BlyS通过激活BAFF-R而促进小鼠T细胞的活化，TACI-Ig对T细胞功能发挥抑制作用。（7）BlyS可能通过与其淋巴细胞受体结合调节T、B淋巴细胞间相互作用参与RA的发病机制。