从血管神经再生探讨补脑I号干预MSCs移植治疗AD小鼠的作用机制

Alzheimer's disease is a degenerative disease of central nervous system，the etiology is not clear，There is no effective treatment methods。Recent studies show that vascular neuropathy influence plays a fundamental role in the Alzheimer's disease(AD). In the course of Chinese medicine" heart kidney related" theory, to the Bunao-I treatment AD has good curative effect. Based on above theory and our feasibility research,putting vascular nerve regeneration as the research target ,to Bunao-I and bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) for intervention factors. Use of the international recognized APP/SP-1 transgenic mice as the research object.Through the trsing immunohistochemistry, Western blot ,ELESA and RT-PCR technology, understand the hippocampus nerve regeneration mice blood vessels. Through in vitro cell culture technology observation Bunao-I, the influence of the serum containing medicine on MSCs ,Vascular endothelial cells,nerve cells, MSCs + vascular endothelial cells,MSCs + nerve cells。From the experiment in the Bunao-I discussed the mechanism of the AD treatment，to provide theoretical and experimental basis for the clinica medication. Simultaneously, by observing the Bunao-I on the MSCs effect to prove the heart and kidney and kidney domination of the traditional Chinese medicine theory ,from stem cell research level to verify "vascular nerver regeneration"and Chinese"heart kidney related"theories of relativity.

老年性痴呆（AD）是一种中枢神经系统退行性疾病，其病因病机不清，尚无有效治疗方法。现代研究认为血管神经病变是AD发病基础，本课题组结合中医"心肾相关"理论，自拟补脑I号治疗AD有较好疗效。我们在前期研究基础上，以血管神经再生为靶点，以补脑I号及骨髓间充质干细胞（MSCs）为干预因素，利用国际公认的APP/SP-1转基因小鼠为研究对象，通过免疫组化、western blot 、ELESA及RT-PCR技术了解小鼠海马神经、脑微血管内皮细胞（CECs）再生情况；通过体外细胞培养技术观察补脑I号含药血清对MSCs、CECs、海马神经细胞及MSCs+CECs、MSCs+海马神经细胞的影响。从体内外实验探讨脑I号治疗AD的作用机理，为临床用药提供理论和实验依据。同时通过观察补脑I号对MSCs作用的影响来证明理论与AD相关性及从干细胞研究水平来验证"血管神经再生"与中医"心肾相关"理论的相关性。

老年性痴呆（AD）是一种中枢神经系统退行性疾病，其病因病机不清，尚无有效治疗方法。现代研究认为血管神经病变是AD发病基础，本课题组结合中医"心肾相关"理论，自拟补脑I号治疗AD有较好疗效。我们在前期研究基础上，以血管神经再生为靶点，以补脑I号及骨髓间充质干细胞（MSCs）为干预因素，利用国际公认的APP/SP-1转基因小鼠为研究对象，从体内外实验探讨脑I号治疗AD的作用机理，为临床用药提供理论和实验依据。同时通过观察补脑I号对MSCs作用的影响来证明理论与AD相关性及从干细胞研究水平来验证"血管神经再生"与中医"心肾相关"理论的相关性。. 体内实验研究方面，体外分离培养MSCs，移植于APP/SP-1转基因小鼠脑内，同时予补脑I号干预，运用免疫组化、western blot 及RT-PCR技术检测小鼠血管神经再生，结果显示BMSCs促使小鼠海马区VEGF表达及CD31毛细血管密度上升而ICAM-1表达下降、神经元标志物NF200表达增高，且而补脑I号有增强其功能作用。体外实验通过建立海马神经元缺氧缺糖模型，通过补脑I号含药血清对体外培养的MSCs分化为VEGF、血管内皮细胞及神经元的作用分析，结果显示缺氧复氧后，脑微血管内皮细胞部分凋亡，ICAM-1应激性增多，VEGF降低.补脑Ⅰ号、MSCs可促进脑微血管内皮细胞繁殖，促进VEGF、NF200表达增多，ICAM-1表达下降，对海马神经元缺氧缺糖模型有双向保护作用。为临床运用和进一步研究提供了实验依据。. 通过本课题研究培养人才11人，其中教师7人，硕士研究生4人；目前完成毕业论文3篇，待完成1篇（今年毕业硕士研究生）。研究成果已待在国内核心学术期刊发表。