以水通道蛋白表达揭示“活血利水”法本质

依据中医"血不利则为水"理论创立的"活血利水"法，对中医治疗学意义重大，广泛指导中医临床组方；"活血利水"法内涵活血"以消肿、以利尿（水）"，但其现代医学本质表述不清。在前期对中药调节AQP效应研究基础上，以血管内皮细胞（VEC）和水通道蛋白1（AQP1）为主要证据，采用MR分子影像技术，活体动态、实时定量观测血瘀证模型大鼠外伤局部与肾组织AQP1整体表达特征，比照Western blot、real-time-PCR法呈现组织AQP局部表达特点，结合AQP1磷酸化与胞内分布变化，以丹参与乙酰唑胺对AQP调节效应相参照，寻求丹参效应机制；旨在①揭示"活血利水"与AQP特征表达的关系表述"法"本质，②探索丹参调节AQP效应的可能机制。本研究从中医整体观角度，诠释中医"活血利水"法部分实质，为中医"瘀水病证"临床辨治新技术创建提供科学依据，冀使分子影像技术成为中医药理论研究和临床观察的新方法。

目的：依据中医“血水同源、血不利则为水”理论创立的“活血利水”法，内涵活血“以消肿、以利尿（水）”，对中医治疗学意义重大，广泛指导中医临床组方；本研究以AQP表达诠释“活血利水”法现代医学本质。方法：在前期对中药调节AQP效应研究基础上，以血管内皮细胞（VEC）和水通道蛋白1（AQP1）为主要证据，采用Western blot、rt-PCR法检测血瘀证模型大鼠外伤局部与肾组织AQP1整体表达特征，以丹参与CAs抑制剂（乙酰唑胺）对AQP调节效应比照，寻求丹参效应机制。结果：①外伤“血瘀证”大鼠模型损伤肌肉组织血管内皮细胞膜与肾脏AQP1表达均显著性降低（P<0.01），组织干湿比变化与AQP表达有关；显示“血瘀和水肿”并存的中医病理、即瘀水病证。初步验证AQP可能是“瘀水关联”分子之一。②丹参上调肌肉与肾组织血管内皮细胞膜AQP1表达，促使H2O自组织进入血管，改善损伤肌肉组织局部水肿、减轻肾组织瘀肿，提示丹参“活血”功效与AQP1相关。反证AQP1应是“瘀水病证”分子靶标。③丹参对损伤局部与肾组织AQP1调节效应、促进组织肿胀消退，体现“活血消肿”功效；丹参对肾小管AQP1/AQP2调节效应、促进H2O排出体外，体现“活血利尿”功效；丹参对肺组织AQP1调节效应，促进肺泡H2O入血转运并维持张力、加速CO2弥散排出与O2弥散入血，体现丹参“活血行气/活血养血”功效；丹参“活血”功效呈现的“消肿、利尿、养血”效应，④创建病证临检新技术2项，预示“瘀水病证”研究新方向。结论：①证实“活血利水”法与AQP密切相关，初步验证“活血利水”法部分本质。②丹参调节AQP效应可能与CAs活性有关。③创新提出“活血利水”法新亚法--“活血消肿、活血利尿、活血行气”三法，“活血行气”为“活血利水”法先导，“活血消肿/活血利尿”为“活血利水”法之根本所在。