二肽酶基酶-4在慢性应激抑制下肢血管再生中的作用及其机制

The morbidity of lower extremity atherosclerotic disease (LEAD) has increased year by year. Chronic stress attenuates the ability of angiogenesis, deteriorates LEAD's prognosis. It is an urgent task for medical experts all over the world to find the target in the treatment of LEDA induced by chronic stress, to clear the mechanism, to develop of safe and effective treatment. We apply immobilization stress model and hindlimb ischemic model to study the effect of stress on ischemia-induced angiogenesis. Next, we apply DPP-4 nude rat to confirm the role of DPP-4 in ischemia-induced angiogenesis under stress. We reveal the possible mechanisms through using various detection methods, such as molecular biology, immunohistochemistry, flow cytometer, gene chip technology and several Proteome Profiler TM Arrays from in vivo and in vitro level. The role of DPP-4 on Impairment of Ischemia-Induced Neovascularization under chronic stress condition may be mediated by regulating the biological behavior of ECs/EPCs through regulating angiogenesis related signal protein and may be depended on Akt/eNOS signal pathway. This study will provide new ideas and new therapeutic targets for the treatment of lower extremity arterial disease.

下肢缺血性疾病的发病率呈逐年上升，且慢性应激降低了血管再生能力及其预后，因此明确其作用机制成为医学专家亟需解决的难题。二肽基肽酶-4(DPP-4) 在血管再生过程中发挥重要作用。但是慢性应激是否能通过增加DPP-4活性发挥其血管再生作用目前尚无报道。本研究利用制动应激模型和下肢缺血模型，明确制动应激对缺血性血管再生的作用。应用DPP-4基因缺陷大鼠进一步证实DPP-4在应激条件下在缺血性血管再生中的作用。从在体动物实验和离体细胞培养层面，采用分子生物学、免疫组织化学、流式细胞仪、基因芯片技术及数种Proteome Profiler TM Array法等多种检测方法揭示DPP-4在应激条件下在缺血性血管再生中的作用可能是通过血管再生相关的信号蛋白对ECs/EPCs生物学行为的调控机制起作用，并可能通过Akt/eNOS信号途径起作用。本研究为寻找治疗下肢动脉性疾病新治疗靶点提供理。

下肢缺血性疾病的发病率呈逐年上升,慢性应激降低了血管再生能力及其预后。慢性应激导致二肽基肽酶-4(DPP-4)活性增加，并且DPP-4在血管再生过程中发挥重要作用。因此，我们推测慢性应激通过增加DPP-4活性进而发挥心血管损伤作用。本研究的总体目标是探讨慢性应激对下肢缺血性血管再生的作用，以及DPP-4在应激条件下在缺血性血管再生中的作用，为寻找治疗下肢动脉性疾病新治疗靶点提供理论依据。本研究利用制动应激和下肢缺血小鼠模型,系统观察发现:(1) 慢性应激增加DPP-4在血浆和肌肉中的活性，降低胰高血糖素样肽-1（GLP-1）和脂联素在血浆中的浓度；(2) 慢性应激抑制下肢血管再生，使缺血后下肢血流恢复能力受损；（3）GLP-1激动剂和DPP-4抑制剂对慢性应激导致的下肢血流恢复受损起改善作用；（4）应用DPP-4基因敲除小鼠进一步证实DPP-4对慢性应激导致的血管再生能力受损起改善作用；（5）蛋白组学研究发现制动应激后Akt、eNOS磷酸化减少，给予GLP-1激动剂和DPP-4抑制剂对Akt、eNOS磷酸化的减少起改善作用。上述研究结果初步证实了抑制DPP-4能够促进慢性应激下缺血性下肢的血管新生及其相关机制。