Chemerin激活氧化应激在重症急性胰腺炎门静脉内皮细胞损伤中的作用及机制研究

Pancreatic portal venous thrombosis (PVST) is an important late complication of severe acute pancreatitis (SAP), which is directly related to the prognosis of the disease. Our previous study shown that the main cause of PVST is the injury of venous endothelial cells in the early stage of pancreatitis. As ROS plays an important role in thrombosis and SAP, we inferred that ROS could promote the injury process of PVST endothelial cells. As we all know,obesity has been proved to be related to the process of ROS production and our previous studies screened all kinds of adipocytokine in AP and found Chemerin to be the primary one. At the same time, chemerin also has been found to be associated with the severity of AP. In our self-constructed chemerin knockout mice, the loss of Chemerin protein can alleviate the injury of vascular endothelial cells in SAP model. It has been confirmed that Chemerin can activate oxidative stress in vivo, and oxidative stress plays an important role in AP inflammation. However, its function in endothelial cell injury remains to be further explored. Therefore, this study hopes to explore the specific mechanism of early portal venous endothelial cell injury in SAP in vivo/vitro methods.

胰源性门脉系统血栓(PVST)是重症急性胰腺炎(SAP)晚期的重要并发症，与疾病预后直接相关。我们前期的临床和基础研究证实：AP早期门静脉内皮细胞损伤是其发病的关键因素。鉴于氧化应激在血栓和胰腺炎急性期都扮演着重要角色，我们认为ROS能促进SAP中内皮细胞的损伤。众所周知，肥胖和脂肪是ROS产生的重要的促进因素，我们的研究还发现肥胖是胰腺炎高凝、血栓状态的高危因素之一。我们前期检测动物AP模型中脂肪细胞因子的表达，发现变化最为显著的是Chemerin。我们还通过自主构建的Chemerin KO小鼠模型，发现Chemerin蛋白缺失可减轻SAP模型中门静脉内皮细胞损伤。目前已有体外实验证实Chemerin可激活ROS，但其在动物体内与ROS的联系及对内皮损伤的作用有待进一步探究。因此，本研究通过体内/体外实验，希望证实Chemerin激活氧化应激在门静脉血管内皮的损伤作用机制。

背景：急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是常见的消化系统疾病，当其发展为重症时死亡率明显增加。腺泡细胞死亡是胰腺炎发生的关键生物学过程，当其发生时不仅引起局部胰腺坏死，也会进一步触发局部及全身的炎症反应，因此靶向腺泡细胞治疗是治疗胰腺炎的重要方向。脂肪代谢在胰腺炎的发生、发展中具有重要的调控作用。Chemerin作为近年来新发现的脂肪因子，在多种炎症性疾病中均具有重要的调控作用，然而其在胰腺炎中的作用缺乏相关报道。.目的：本研究旨在明确Chemerin在急性胰腺炎中发挥的作用并一步探讨具体的作用机制。.方法与结果：首先研究纳入93名急性期胰腺炎患者，联合28名健康对照进行临床相关分析。结果发现，相对于健康对照，急性胰腺炎患者血清Chemerin水平升高，进一步将胰腺炎患者分为轻、中、重度，发现血清Chemerin与急性胰腺炎严重程度相关，可以作为预测重症胰腺炎的生物标志物。进一步构建Chemerin基因敲除小鼠，雨蛙素及胰胆管结扎模型证明Chemerin敲除可以加重小鼠胰腺炎严重程度以及胰腺坏死；受体CMKLR1基因敲除同样可以加重小鼠胰腺炎严重程度及胰腺坏死；使用外源性重组蛋白Chemerin及Chemerin-9发现外源性重组蛋白可以改善小鼠胰腺炎严重程度及腺泡细胞死亡。最后通过western blot筛选死亡相关通路，结果发现Chemerin可以通过激活AMPK和AKT通路抑制NLRP3炎症小体介导的焦亡，而分别使用AMPK及AKT抑制剂可以阻断Chemerin-9对腺泡细胞的保护作用。.结论：结合以上临床分析和基础实验观察，本研究发现血清Chemerin在AP患者中表达升高，可以作为预测SAP的生物标志物。进一步明确其功能，发现Chemerin可以通过激活AMPK和AKT通路抑制NLRP3炎症小体介导的腺泡细胞焦亡从而在AP中发挥调控作用。本研究丰富了Chemerin参与疾病调控作用的认知，给Chemerin介导的临床治疗转化提供了一定的理论支持，为探索SAP治疗靶点提供新的思路。