Toll样受体信号转导通路在良性前列腺增生症组织炎症发生与发展中的作用机制研究

Benign prostatic hyperplasia (BPH) is commonly happened in elder patients, however, its pathogenesis is still unclear. Our previous study and other studies indicated that inflammation often occurred in BPH tissue, and may be an important factor of BPH pathogenesis, however, the development and progression of inflammation are still unclear. TLR signaling is one of the important part of the human natural immunity and first line of resistance invasion of pathogen, could induce inflammatory releasing and proliferation of BPH cells. Many studies found that key protein of TLR signaling were detected in BPH tissue. Ligands of TLR could induce activation of NF-κB and releasing of inflammatory. Therefore, we suspected that BPH cell proliferation and inflammatory releasing caused by TLR signaling was one of the most important factors for BPH tissue inflammation and cell proliferation. In the present item, we decided to use multiply technique to prove that TLR signaling is an important pathway in prostate to induce the hyperplasia of prostate and infiltration of lymphocyte.

良性前列腺增生（BPH）是老年男性最常见疾病，发病机制尚不明确。我们的前期和国内外的研究发现BPH的组织炎症普遍存在，是其发病的一个重要因素。但BPH组织炎症如何发生、如何进展，尚不明确。TLR信号转导通路是天然免疫应答的重要组成部分，是人体抵抗病原体的第一线，可诱导炎症细胞因子释放与细胞增殖。有研究发现TLR信号通路重要分子mRNA表达于前列腺组织。支原体与脂多糖刺激前列腺细胞后，可出现TLR4表达升高、NF-κB活化与炎症因子释放。因此，我们提出TLR信号转导通路可以诱发BPH炎症细胞因子释放与前列腺细胞增殖，是导致BPH发病的重要原因。本项目拟通过炎症细胞因子基因芯片、高通量蛋白芯片等技术证实TLR信号通路可诱导前列腺中炎症因子表达与细胞增殖，并通过RNA干扰技术与缺陷病毒载体系统、Micro RNA等技术阐明该通路所介导的前列腺细胞增殖与组织炎症细胞因子释放的具体分子调控机制。

良性前列腺增生（BPH）是最常见的引起中老年男性病人排尿困难的疾病，慢性组织炎症与BPH的发生和发展过程密切相关。Toll样受体（TLR）是固有免疫和适应性免疫中重要的一类受体，在配体（如病原体及其代谢产物）的刺激下，能激活炎症信号通路，诱导炎症的发生与持续。目前国内外研究对TLR4在BPH的发病过程中的作用有一定的探索，但未见有对TLR2和能与其形成异二聚体的TLR10的研究报道。我们前期研究发现高迁移率族蛋白B-1（HMGB1）可能参与了BPH 的发生与发展过程。因此本研究主要探索作为HMGB1受体的TLR2以及TLR10在BPH的发生与发展过程中的作用机制。我们通过收集BPH患者临床病例资料和BPH组织标本，测定TLR2、TLR10和HMGB1在BPH组织中的表达及分布，探讨TLR2和TLR10是否参与BPH的发生与发展过程；进一步的，我们通过使用LPS和/或HMGB1刺激RWPE-1细胞，检测TLR2和TLR10在前列腺上皮细胞受到炎性刺激后的炎症因子水平，明确两者参与BPH的具体机制；最后，我们还通过小RNA干扰 （siRNA）技术，明确TLR2和/或TLR10基因沉默后，前列腺上皮细胞炎症信号传导的变化，了解TLR2及TLR10是否有成为基因治疗靶点蛋白的可能。我们的研究结果表明：BPH组织伴不同程度的组织炎症的比例高达96.7%；不仅BPH组织炎症与多项临床指标正相关，组织炎症的程度还与组织中TLR2、TLR10和HMGB1的表达正相关，证明TLR2和TLR4参与的组织炎症对BPH的发生和发展有重要的作用。在LPS/HMGB1刺激下，RWPE-1细胞的TLR2、TLR10、IL-6和IL-8的mRNA表达量均增加，说明TLR2和TLR10的表达与组织/细胞的炎症程度呈正相关。siRNA干扰实验表明，沉默TLR2导致下游炎症信号的强度减弱，相反的，沉默TLR10导致下游炎症信号强度增加。综上，我们的研究证实TLR2和TLR10通过相互拮抗的作用，参与炎症促进BPH发生发展的过程。本课题的实施将进一步揭示TLR参与到BPH的可能发病机制及BPH和组织炎症之间的关系，也将为精准化治疗BPH提供新的思路。