中药山茱萸及其有效成分莫诺苷对脑卒中后神经血管稳态重构Wnt信号通路的影响

脑损伤是三大疾病之一，脑保护药都有动物实验有效而临床无效问题。.提出神经血管稳态重构假说，从山茱萸筛选莫诺苷，2个国基金验证了它神经血管稳态重构作用，拟探索对Wnt信号通路影响：①核磁共振检测脑梗死体积和N-乙酰天门冬氨酸、肌酸/磷酸肌酸、胆碱和乳酸代谢变化，活体动态观察对神经血管重构影响；②荧光双标观察对BrdU和PSA-NCAM、MAP2ab影响，确定对新生神经元影响；③对Wnt通路β-catenin、Wnt3a、Fri、Dsh、APC、GSK3、Axin、TCF、LEF影响，确定对神经发生影响；④对Wnt通路Wnt7a、CD31、CD34影响，确定对血管新生影响。⑤对Wnt相关神经因子Pax6、Tbr1、Tbr2、Meis2、Ngn2影响，确定其作用。.通过山茱萸对Wnt信号通路影响，探索神经血管稳态重构信号调节机制，发现先导化合物和干预新靶点，对降低脑卒中死亡率和致残率有重要意义

缺血性脑损伤是严重威胁人类健康疾病之一，脑保护药都有动物实验有效临床应用无效问题。前期实验结果表明，我们自行提取的莫诺苷有提高神经元存活率、改善神经和运动功能的作用，在本基金的资助下，我们主要完成的实验内容有：①对山茱萸水提取、大孔树脂分离、制备液相纯化、高效液相进行含量测定，得到含量大于95%的莫诺苷化合物，用于动物实验；②通过莫诺苷对大鼠缺血性脑损伤动物模型梗死体积和行为学的影响，确定莫诺苷对神经血管重构及神经功能恢复的作用。③通过莫诺苷对神经发生及血管新生相关Wnt信号蛋白的影响及Wnt相关神经因子的影响，探索莫诺苷促进神经发生、血管新生的Wnt信号通路机制。.从完成的实验结果来看，莫诺苷能促进局灶性脑缺血大鼠SVZ区神经干细胞增殖和分化成熟，促进促神经发生调节因子的表达，并持续激活Wnt信号通路神经发生相关蛋白及血管新生相关蛋白的表达，促进神经功能恢复和较小梗死体积。以上实验结果表明莫诺苷可以持续激活Wnt信号通路，对局灶性脑缺血大鼠模型有神经保护和神经修复作用，从而进一步促进“神经血管稳态重构”。在该基金资助下，发表文章28篇，其中核心期刊22篇，SCI论文3篇；申请1项国家发明专利；培养研究生9人，毕业4人。.本课题所研究的化合物莫诺苷为结构明确的化合物，通过下一步完善药学、药效学等的研究，对发现具有治疗脑卒中作用的先导化合物，形成具有原创性、自助知识产权新药，提高我国新药研究水平有重要作用。同时本研究在一定程度上验证了我们针对脑卒中等脑损伤所提出“神经血管稳态重构”假说，对提高脑卒中防治的理论水平，最新诠释防治脑卒中的心策略具有一定的意义。此外，通过本研究有可能形成新的知识产权药物，大幅度降低缺血性脑损伤的死亡率和致残率，减轻社会医疗费用的支持和家庭负担，对经济建设和社会发展有巨大贡献，具有重大的经济价值和社会价值。