肝刺激因子HSS对肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用及机制

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝胆临床外科中常见的问题，如肝外伤、肝切除和肝移植，是影响肝脏疾病预后和肝脏手术成功率的重要因素。应用具有肝细胞保护作用的生长因子为HIRI的防治提供了新途径。作为肝源性、肝脏特异性的生长因子，近年来发现肝刺激因子HSS具有肝细胞特异性的保护作用，显示出在肝脏疾病治疗中的应用潜力。其保护机制还不明确，可能与稳定线粒体膜孔道MPT、减轻内质网应激有关。由此出发，本项目拟设计研究HSS对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。利用肝细胞缺氧-复氧模型，检测过表达和抑制HSS的肝癌细胞对损伤的耐受能力，进一步通过检测线粒体的功能、线粒体MPT孔的开放、内质网应激反应，研究HSS对肝脏损伤的保护机制。进而在小鼠肝脏缺血-再灌损伤动物模型上，研究HSS的保护作用及可能的机制。本研究不仅为HSS的肝细胞保护提供新的理论基础，而且具有潜在的应用前景，为临床实际应用奠定了基础。

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝胆临床外科中常见的问题，如肝外伤、肝切除和肝移植，是影响肝脏疾病预后和肝脏手术成功率的重要因素。其机制可能与氧化应激、钙超载、炎症反应引起的肝脏损伤有关。应用具有肝细胞保护作用的生长因子为HIRI的防治提供了新途径。近年来发现，肝刺激因子HSS作为肝源性、肝脏特异性的生长因子，具有肝细胞特异性的保护作用，显示出在肝脏疾病治疗中的应用潜力。本研究利用肝脏缺血-再灌损伤的细胞和动物模型，评价HSS基因治疗对于肝脏缺血-再灌损伤的保护作用及机制。应用缺氧-复氧处理肝癌细胞模拟体内缺血-再灌注损伤发现，HSS基因治疗组H/R后细胞存活率升高和细胞凋亡水平降低，且ATP含量、线粒体膜电势较高，线粒体细胞色素C的漏出减少，ROS产生降低。提示HSS可以抵抗缺氧-复氧损伤引起的肝细胞损伤，其保护机制可能与减轻H/R引起的肝细胞的线粒体损伤、线粒体途径的细胞凋亡、线粒体ROS的产生有关。. 进一步利用小鼠肝脏缺血-再灌注损伤模型发现，HSS基因治疗可以减轻小鼠缺血/再灌注（I/R）引起的肝脏功能损伤、肝脏形态结构改变及肝细胞凋亡，与对照组比较HSS治疗组肝功能ALT、AST、LDH水平降低，肝组织形态学有明显改善，肝小叶结构较完整清晰，肝细胞变性、坏死减少，肝组织坏死面积明显减少，肝细胞凋亡减少。且HSS治疗组线粒体的亚显微结构，线粒体ATP水平明显改善，线粒体呼吸链复合物I的活性升高，表明HSS对I/R损伤的肝细胞保护作用与HSS保护线粒体的结构和功能有密切关系。. 本研究首次证明了腺病毒载体介导的HSS基因转染可以减轻小鼠肝脏缺血-再灌注损伤，对肝细胞低氧-复氧损伤也有保护作用，提示其作为肝细胞保护剂应用的可能。HSS减轻肝细胞缺血-再灌损伤的机制与促进线粒体功能、降低线粒体膜通透性，减少线粒体ROS产生，提高线粒体呼吸链复合物活性等有关。本研究不仅为HSS的肝细胞保护提供新的理论基础，而且具有潜在的应用前景，为临床实际应用奠定了基础。