硫化氢在烧伤大鼠创面愈合中的作用及其机制研究

烧伤创面愈合涉及多种炎症细胞，修复细胞，炎症介质，生长因子及细胞外基质成分的参与，一直是国内外烧伤外科学领域研究与治疗的难点。H2S参与多种生理与病理生理过程，具有广泛的生物学效应，其对创伤的影响引起人们的重视。根据我们先前对H2S在严重烧伤大鼠脏器保护作用的相关研究，结合当前本领域的进展，提出H2S在烧伤创面愈合过程发挥重要作用的设想。拟探究烧伤创面组织H2S/CSE体系的变化规律；应用H2S供体和H2S合成酶抑制剂对烧伤大鼠进行干预，从调节创面愈合的细胞、生长因子以及细胞外基质方面的多个指标进行筛查，在动物水平较全面的论证H2S参与创面愈合的机制；从大鼠烧伤创面分离巨噬细胞和成纤维细胞进行体外培养，应用硫化氢供体和KATP通道抑制剂进行干预，在细胞水平进一步探究H2S对创面愈合机制的作用，并研究H2S对烧伤创面巨噬细胞炎症反应调控的分子机制。为烧伤患者创面修复提供一条新的思路。

项目研究背景：烧伤后创面的愈合有多种组织和修复细胞、细胞外基质及各种调控因素参与。1996年，科学家首次发现人体内源性H2S可作为一种神经活性物质而存在。近年来已证明，内源性H2S在神经系统、心血管系统、消化系统及生殖系统等方面的生理作用使其在药物开发的前景等方面也越来越引起人们的重视。.主要研究内容：本课题探究了烧伤创面组织H2S/CSE体系的变化规律；应用H2S供体和H2S合成酶抑制剂对烧伤大鼠进行干预，从调节创面愈合的细胞、生长因子以及细胞外基质这几个方面的多个指标进行筛查，在动物水平较论证H2S参与创面愈合的机制；应用硫化氢供体和KATP通道抑制剂对体外培养巨噬细胞和成纤维细胞进行干预，在细胞水平进一步探究H2S对创面愈合机制的作用，并研究了H2S对烧伤创面巨噬细胞炎症反应调控的分子机制。 .重要结果： 1、烧伤创面组织H2S/CSE体系功能降低；2、给予微量外源性硫化氢能延迟烧伤创面溶痂时间，同时促进烧伤创面愈合；3、给予微量外源性硫化氢促进血管形成；4、给予微量外源性硫化氢促进创面羟脯氨酸含量；5、给予微量外源性硫化氢创面TGFα和FGF含量增高；6、烧伤后大鼠创面巨噬细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系功能降低；7、微量的外源性硫化氢对烧伤创面巨噬细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系有促进作用；8、微量的外源性硫化氢可使烧伤创面巨噬细胞凋亡情况减轻；9、小剂量给予NaHS可促进烧伤创面巨噬细胞分泌bFGF和TGF-β1；10、小剂量给予NaHS可抑制创面巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-α；11、微量的外源性硫化氢对烧伤创面成纤维细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系有促进作用；12、微量的外源性硫化氢可以促进烧伤创面成纤维细胞分泌胶原蛋白I和胶原蛋白III；13、小剂量给予NaHS可促进烧伤创面成纤维细胞分泌bFGF和TGF-β1；14、微量的外源性硫化氢可使烧伤创面处于分裂增殖期的成纤维细胞增多；15、微量的外源性硫化氢可使烧伤创面巨噬细胞MAPKs信号通路减弱。.科学意义：本课题证明硫化氢能促进烧伤创面愈合，减轻创面炎症反应。研究结果对完善烧伤创面修复理论具有重要的意义，同时对硫化氢药物的开发提供了实验基础数据。