抗癌及识别G4-DNA双功能手性多吡啶铂配合物的合成和构效关系

To aim at poor water-solubility and acute cross resistance of oxaliplatin, a series of chiral-2-[n-(R)-phenyl] imidazo-[4, 5-f][1,10]-phenanthroline-hexamethylene diamine platinum complexes will be synthesized. On the basis of the combination of UV and FRET melting assays, fluorometric titration, fluorescence competition titration, CD titration, NMR spectroscopy, gel electrophoresis, S1 nuclease decomposition and mutagenicity test, the effects of the position isomerism, electron effect and chiral isomerism on the stability of G4-DNA should be investigated. The chiral L and D could selectively recognize five different human telomeric G4-DNA structures, which might reveal the relationship between chiral selectivity and conformation, sequence, four-G-tetrad, the difference among propeller loop, Compared with oxaliplatin, antitumor activity is able to be estimated by means of MTT methods in vitro and experimental pharmacodynamics in vivo animal model. According to solubility quantitative determination in distilled water and cross-resistance study, aqueous solubility and cross resistance may be detected, which will be capable of providing a technical assistance for developing an highly active oxaliplatin analogues with good water solubility and mild cross resistance.

针对奥沙利铂水溶性差，交叉耐药率高的不足，拟合成50-60个系列手性-2-[n-(R)-苯基]咪唑并[4,5-f][1,10]-邻菲啰啉-环己二胺铂配合物。采用UV熔点、FRET熔点、荧光滴定、荧光竞争滴定、CD滴定、NMR光谱、凝胶电泳、S1核酸酶分解和突变实验，研究取代基位置异构、电子效应和手性异构对G4-DNA稳定性的影响；借助手性异构体L和D对五种不同结构G4-DNA的识别，探索手性选择与构象、序列和四分体层数的关系，以奥沙利铂为参照物，通过体外MTT法和体内动物模型药效实验，评估L和D的活性；进行水中溶解度测定和交叉耐药性实验，检验它们的水溶性和交叉耐药性，为开发水溶性好，交叉耐药率低的高活性奥沙利铂类似药提供技术支持

（一）主要进展 .⒈ 配体的优化设计与可控合成.设计和合成系列多咪唑、多吡啶、多羧酸等多齿桥连配体。使用微波法已合成2-吡啶苯并咪唑(2-Pbim)、双苯并咪唑(H2bibim)、2,6-二苯并咪唑吡啶(bbp)、手性-2-[2-（羟基）-4-（甲氧基）-苯基]咪唑并[4,5-f][1,10]-邻菲啰啉等配体. ⒉ 合成配合物.在各种组装条件下，采用相同小分子组分与不同金属离子、不同小分子组分与同一种金属离子，自组装出各种维数不同的配合物，一年共合成5个配合物。.⒊ 结构分析.采用核磁共振谱、红外光谱、紫外-可见吸收光谱、拉曼光谱、质谱、元素分析等手段，对配体及配位聚合物进行初步的化学成分分析与结构表征；用 X-射线结构分析方法测定配位聚合物的空间结构。.核磁共振谱和质谱表明：（1）和（2）是单核结构。.X-射线单晶分析表明：（3）和（4）是一维结构，（5）是二维结构。.⒋ 开展配合物与 DNA 作用的研究.采用紫外-可见吸收光谱滴定及荧光光谱滴定，开展系列配合物与 DNA 作用的研究，结果表明：随着DNA浓度的增加，配合物荧光强度增加；在紫外-可见吸收光谱中，配合物出现了增色效应，红移和蓝移现象。这表明配合物通过插入和沟槽键合与DNA作用，并通过计算它们的结合常数，说明配合物对DNA有很强的插入能力。.⒌ 开展配合物对BEL–7404、HepG2、NCI–H460、T–24、MGC–803和A549等肿瘤细胞的抑制作用的研究.采用MTT法，研究配合物对BEL–7404、HepG2、NCI–H460、T–24、MGC–803和A549等肿瘤细胞的抑制作用，结果表明：配合物对BEL–7404、HepG2、NCI–H460、T–24、MGC–803和A549具有较好的细胞毒活性，其抑制率分别在39.87% 至84.81%之间。与临床用铂类药物顺铂相比，Δ-Pt对BEL–7404（人肝癌细胞）、NCI–H460（人肺癌细胞）和MGC–803（人胃癌细胞）三种细胞株，表现出比顺铂更高的体外增殖抑制活性。此外，Λ-Pt对六种人肿瘤细胞株的体外增殖抑制活性较弱。