“清肝化瘀方”对婴儿CMV感染HEL及病毒基因表达的影响机制研究

HCMV infection which causes apparatus disease and the spread infection of the whole body, and endangers children's health and lives seriously is the most common viral infection during the neonatal and infant periods. Try to observe the growth and reproduction of the host cell and explain the pathogenic mechanism of the change about the morphology, function and cell cycle can be an important way to find new anti-HCMV treatment strategies. It has been scientifically proven that Chinese medicine has clinical efficacy in the treatment of HCMV infection in recent years. More and more attention to basic research on herbs of anti-HCMV should be paid. The empirical formula "Qing-gan Hua-yu Formula" which has curative effect on infant with CMV hepatitis will be studied to explore the change about the proliferation, apoptosis and the cell cycle of host cell when human embryonic lung fibroblast ( HEL) is infected. Study the interactions of HCMV infection and cells base on the sequential changes during transcription of immediate-early, early and late genes. Research and clarify the molecular mechanism of "Qing-gan Hua-yu Formula" from multiple areas of HCMV life cycle.

HCMV感染是我国新生儿及婴儿时期最常见的一种病毒感染性疾病，可导致相应的脏器疾病及全身播散型感染，严重危害着小儿的生命健康。全面阐释HCMV进入宿主细胞生长、繁殖，使宿主细胞形态、功能及周期发生改变的致病机制，以及药物的作用靶点，将为寻找新的抗CMV治疗手段提供策略。近年来随着中医药治疗CMV感染的临床有效性得到了科学验证，中药抗CMV的基础研究也越来越引起重视。本项目拟在临床研究基础上，采用治疗婴儿CMV肝炎的中药"清肝化瘀方"，探讨HCMV感染人胚肺成纤维细胞（human embryonic lung fibroblast，HEL）后宿主细胞增殖、凋亡及周期的改变，以HCMV即刻早期、早期和晚期基因转录的时序性变化为靶点，研究HCMV感染与细胞的相互作用；从HCMV生命周期的多个环节，研究并阐明"清肝化瘀方"的分子学作用机制。

HCMV感染是我国新生儿及婴儿时期最常见的一种病毒感染性疾病，尤其在胎儿、新生儿及免疫功能缺陷或低下（器官移植或恶性肿瘤）者，可导致相应的脏器疾病及全身播散型感染，严重危害着小儿的生命健康。目前临床上用于治疗HCMV感染的一线药物仍仅局限于更昔洛韦等，但剂量相关性毒性及耐药性又进一步限制了其应用。全面阐释HCMV进入宿主细胞生长、繁殖，使宿主细胞形态、功能及周期发生改变的致病机制，以及药物的作用靶点，将为寻找新的抗CMV治疗手段提供策略。近年来随着中医药治疗CMV感染的临床有效性得到了科学验证，中药抗CMV的基础研究也越来越引起重视。. 本项目的目的，是在临床验证了中药验方“清肝化瘀方”治疗HCMV感染有效性的基础上，探讨“清肝化瘀方”对HCMV感染人胚肺成纤维细胞（human embryonic lung fibroblast，HEL）后，宿主细胞增殖、凋亡及周期的改变，研究并阐明“清肝化瘀方”的作用机制。项目采用分子生物学、分析化学领域等多种先进技术，通过开展“清肝化瘀方”抗CMV的体外实验研究，对HCMV感染后不同感染时间及空白血清、“清肝化瘀方”血清、更昔洛韦血清干预后各组细胞病变、增殖活性、凋亡指数及细胞周期进行了比较，结果显示：“清肝化瘀方”、更昔洛韦药物血清均可较好的促进HCMV感染后的HEL增殖，抑制感染后的HEL凋亡，二者的差异无统计学意义（p>0.05），即“清肝化瘀方”具有与更昔洛韦同样良好的促细胞修复的作用；但对周期改变的干预作用尚不明显。从分子生物学的角度，初步证实了“清肝化瘀方”抗病毒的作用机制。