Claudins重塑视网膜血管内皮细胞紧密连接的调控研究

原有的血-视网膜内屏障紧密连接（TJ）的破坏和/或视网膜新生血管内皮细胞间TJ发育不完善是多种视网膜血管性疾病的共同病理基础，是医学界亟待解决的问题。相关研究表明在血-脑屏障的众多紧密连接蛋白中，Claudin-5的mRNA表达水平占绝对优势；Claudin-5在血-脑屏障的TJ形成中起重要作用，但不是唯一的因素且机制未清。那么，Claudin-5是否是视网膜血管内皮细胞间TJ重塑的关键因子呢？因此，本项目拟采用改良氧诱导法建立血管增殖性视网膜病变鼠模型、腺病毒介导的转基因高表达和RNA干扰技术、荧光实时定量PCR和荧光共聚焦等技术，首次系统探讨Claudins调控视网膜血管内皮细胞紧密连接重塑的机制，寻找最佳的重塑血管内皮细胞TJ屏障的关键因子，为确立Claudins作为视网膜血管性疾病治疗的新靶点提供更充分的科学依据，为视网膜血管性疾病和中枢神经系统疾病的防治开辟新思路、新途径。

血-视网膜内屏障的紧密连接的破坏和/或视网膜新生血管内皮细胞间的紧密连接发育不完善引起渗漏、出血、和/或水肿等是引起视网膜血管性疾病的共同病理基础。Claudins蛋白是形成紧密连接的骨架，在不同的组织和不同的病理生理状态下其表达与分布的变化会引起紧密连接的功能改变。本项目首先发现Claudin-1~-5、-12、-23mRNA在正常小鼠视网膜中的动态变化；Claudin-1、-2、-5在视网膜血管内皮表达，Claudin-3、4、-12、-23不在视网膜血管内皮表达，其中Claudin-3表达于视网膜神经节细胞；在氧诱导视网膜病变模型（OIR）中进一步发现Claudin-1、2、5在视网膜血管内皮细胞胞膜上的线性分布中断，再分布于胞质，且其mRNA及蛋白表达水平也有明显变化；筛选出Claudin-1、-2、-5是调控血-视网膜内屏障的关键因子，其中Claudin-1、-5具有正向的视网膜内屏障保护作用，Claudin-2为负向调控作用；Claudin-3可能在神经诱导血管发育中起重要作用。本项目为确立Claudin-1、-2、-3和-5作为视网膜血管性疾病治疗的新靶点提供更充分的科学依据。