FKBP25调控缺血后血管内皮细胞紧密连接蛋白损伤分子机制研究

Blood-brain barrier (BBB) disruption is considered as a key event in the pathogenesis of brain ischemia. Tight junction between brain microvascular endothelial cells is the structural and functional base of BBB. Our recent study have identified the immunophilin, 25 kDa FK506-binding protein (FKBP25) was located in microvascular endothelial cells. Interestingly, we also found that ischemia-like injury induced the nuclear import of FKBP25 in cultured brain endothelial cells. Given the importance of the endothelial cell in the regulation of BBB permeability, the present study was designed to address the biochemical consequences of FKBP25 disturbance in endothelial cells after ischemia-like injury. We determine the intracellular crosstalk between the imbalance of FKBP25 signaling and nitrosative stress in endothelial cells following ischemia-like injury. Furthermore, we examined whether peroxynitrite scavenger that inhibit the protein nitration of FKBP25 as well as detrimental effects of nitrosative stress could counteract the deleterious effects of ischemia-like insults. The data derived from the present study may lead to specific approaches to prevent or improve vascular complications associated with stroke.

血脑屏障损害是缺血性脑卒中发生发展过程中重要的病理环节。紧密连接蛋白作为血脑屏障的关键组成部分，在缺血早期就易受损降解。我们前期研究发现缺血性脑损伤过程中，亲免蛋白FKBP25在脑微血管内皮细胞表达发生明显改变，且存在细胞浆/核内外穿梭现象。本课题以脑微血管内皮细胞为研究载体，以缺血后FKBP25信号调控为主线开展研究：（1）阐明FKBP25与缺血后内皮细胞紧密连接损伤的内在关联性；（2）论证硝化应激分子事件与FKBP25信号稳态失衡在脑微血管内皮细胞病理损伤过程中的作用模式及关键意义；（3）探索新型过氧亚硝基阴离子清除剂对FKBP25蛋白硝基化修饰及脑微血管内皮细胞损伤、血脑屏障破坏的干预作用及调控机制，旨在揭示血脑屏障紧密连接结构破坏事件中硝化应激信号与FKBP25的调控规律，确证缺血性脑损伤微血管病变的关键作用靶标，以期为开发以脑微血管保护为基础的新型脑卒中防治药物提供新的思路。

脑微血管损伤与临床上缺血性脑卒中发生、发展病理过程密切相关。以脑微血管内皮细胞为研究靶标开展脑微血管结构与功能完整性保护研究是亟待解决的课题。本课题以脑微血管内皮细胞为切入点已经开展的研究内容包括：①发现了缺血性脑损伤过程中，亲免蛋白FKBP25在脑微血管内皮细胞表达发生明显改变，且存在细胞浆/核内外穿梭现象。②进一步阐明了FKBP25与缺血后内皮细胞损伤的内在关联性，探讨了FKBP25与硝化应激交联反应分子事件在脑微血管内皮细胞病理损伤过程中的分子机制及关键意义。③研究了新型过氧亚硝基阴离子清除剂对FKBP25蛋白硝基化修饰及脑微血管内皮细胞损伤、血脑屏障破坏的调控作用，为探索脑微血管保护药物的新型有效“靶标”分子提供了新思路。本项目为治疗以脑血管内皮病变为基础的脑系疾病提供了实验依据，具有潜在的学术价值和实际意义。.在承担本项目基础上，进一步获得了2016浙江省医药卫生科技项目（2015KYA095）等科研项目资助。承担本项目期间培养青年人才及研究生4名。担任了浙江省毒理学会临床药物治疗安全专业委员会委员兼秘书、浙江省医学会临床药学分会青年委员会委员，获得2015年浙江省科学技术进步奖二等奖（R06）；2014年中华医学会临床药学分会全国优秀临床药师，并于2014年、2016年两次获得中华医学会临床药学分会全国学术会议”优秀论文。.承担本项目期间已发表了脑血管病相关联论文2篇，发表在Phytomedicine、Neuroreport等脑血管病、神经系统疾病关联SCI刊物。